单个量子点的荧光光谱成像和散射成像

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量子点作为一种新型荧光探针,与传统荧光染料相比,具有许多优良的光学性质,已在分子生物学、细胞生物学、医学等研究领域获得广泛应用。本文综述了量子点的光学性质、标记方法及在单分子检测领域中的应用之后;围绕多色量子点同时成像和散射成像,开展了以下研究:1、双色量子点单通道同时荧光光谱成像。一种激发光可以同时激发多种量子点发光,如果将某一生物过程中有关的生物分子标记不同颜色的QDs,就可能实现对活细胞内部生物分子之间的相互作用进行检测,或实时观测特定受体的相互作用。由于单通道检测呈现黑白像素图像,每一个像素代表一个灰度值,只能分辨出一种量子点发光。目前,多色量子点的检测主要通过多通道检测器实现。但多通道的透光率会影响量子点的观测。借助透射光栅以荧光光谱成像方式,对同一溶液中标记了两种不同量子点的牛血清蛋白荧光光谱进行了研究,通过测量两种标记物零级和一级光谱之间的距离,成功实现了一个检测器的单通道检测,为分子间相互作用研究打下了基础。2、单个量子点散射成像。单个量子点的研究主要在荧光显微镜下进行,利用暗场散射成像的方法实现了单个量子点的成像。散射成像有助于进一步研究量子点的光学物理特性,也为相近尺寸,难以检测荧光的纳米颗粒提供了替代的检测方法。此前未见暗场显微镜观察量子点的报道。同时实验中采用单个量子点暗场和荧光成像相结合的方法,确认光漂白导致了溶液中量子点的消失。
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