本研究根据Genbank发表的GPV B株全基因组序列,设计并合成引物,用聚合酶链式反应技术扩增GPV中国分离株CZ的NS1基因和VP1基因,结果获得大小分别约为1.9kb、2.2kb的片段。将该片段分别进行克隆及序列测定,并与GPV国内外部分已发表的毒株序列及番鸭细小病毒的序列比较。结果表明,我国地方分离株与国内外鹅细小病毒相比,NS1基因和VP1基因均表现出较高的同源性。CZ株与番鸭细小病毒FM株相应序列比较发现相两者具有较近的亲缘关系。将NS1基因片段从pcDNA3.1载体切下,克隆入pGEX-6p-1中,转化BL21感受态细胞。阳性菌经测序正确后,按1:100比例接种2mL LB液体培养基,过夜培养,再以1:100比例接种10mL 2×YT液体培养基,37℃200rpm摇4 h后,加0.5mM IPTG;诱导5 h后,终止培养,进行SDS-PAGE。结果发现,NS1能够得到高效可溶性表达,命名为GST-NS1。对表达条件进一步优化,发现在不同IPTG工作浓度的诱导下,表达产物均呈高效可溶性表达。将表达产物免疫小鼠获得的多抗进行IFA和Western-blot实验结果表明,GST-NS1具有相应的抗原表位。将NS1基因片段与杆状病毒转座载体pFastBac1连接,筛选出重组转座载体pFastBac1-NS1,转座含有杆状病毒穿梭质粒的大肠杆菌DH10Bac感受态细胞后,获得重组穿梭质粒rBacmid-NS1;将重组质粒DNA转染Sf9昆虫细胞,获得了含有GPV CZ株NS1基因的重组杆状病毒rNS1。重组病毒感染Sf9细胞后,用NS1的原核表达产物免疫小鼠的阳性血清进行IFA和Western blot检测,结果表明:构建的重组杆状病毒能够在昆虫细胞中表达GPV CZ株的NS1蛋白,且NS1蛋白得到很好的加工修饰,为NS1功能研究奠定了基础。