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背景:慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉(Chronic Rhinosinusitis with Nasal Polyps,CRSwNP)是鼻窦及鼻腔粘膜的慢性炎症性疾病,其特点是在鼻粘膜慢性炎症的基础上伴发高度水肿的炎性组织。CRSwNP在人群中的发病率为1%～4%,是鼻科学长期关注的焦点问题之一。目前CRSwNP被认为是多种因素导致的炎症反应,包括解剖异常、感染和非感染性炎症、免疫、遗传因素等。但这些都只是假说,其病因及发病机制并不完全清楚,以至于对于鼻息肉的分型、治疗及减少复发原则方面存在争议,目前有研究表明鼻息肉中自噬水平降低[1,2],自噬参与了鼻息肉的发生。细胞自噬(autophagy)是真核生物细胞中广泛存在的生物现象,其通过多种酶实现自身代谢及细胞器的更新,贯穿于细胞生长发育及病理生理过程,对维持细胞稳态有重要意义,其中LC3-B及P62是两种自噬相关基因。自噬与肿瘤、感染、免疫疾病、退行性病变、炎症性疾病等有关,而且近年来对于靶向自噬的研究也成为热点,期待通过调节细胞自噬水平达到治疗疾病的目的。目前有研究证明调节自噬水平是治疗肿瘤、神经退行性病变、免疫疾病以及炎症性疾病是一种有效途径。鼻息肉的治疗主要包括药物治疗和手术治疗,其中糖皮质激素的治疗可贯穿于手术治疗的前后,局部鼻喷或口服激素可缩小息肉的体积并延缓息肉的生长速度,被形象的称为"药物性鼻息肉切除"[3],但是口服激素对鼻息肉患者自噬水平是否有影响还有待进一步研究。目的:本课题从组织学入手,检测口服糖皮质激素(甲泼尼龙)治疗前后慢性鼻-鼻窦炎伴鼻息肉患者病变组织中自噬相关LC3-B、P62基因及蛋白表达水平的变化情况,分析激素对鼻息肉中自噬水平表达的影响,探讨自噬及其在鼻息肉中的治疗潜力,以探讨甲泼尼龙治疗鼻息肉的药理机制。方法:收集2015.04-2016.04于山东大学齐鲁医院经病理确诊的CRSwNP患者38例(男20例,女18例,年龄27～55岁,平均43.3岁),诊断标准参照2012年昆明诊疗指南[4],服药前于鼻内镜下钳取中鼻道鼻息肉组织为NP(-GC)组,然后给予患者口美卓乐激素治疗15天(甲泼尼龙,前10天20mg/qd,后5天8mg/qd)后,再次钳取同一侧的息肉组织为NP(+GC)组。选取我科同时期确诊的鼻中隔偏曲患者20例(男11例,女9例,年龄23～52岁,平均40.2岁),行鼻内镜手术时,于镜下钳取的中鼻甲黏膜作对照组。各组患者之间的年龄构成差异(P=0.318)及性别构成差异(P=0.460)之间无统计学意义。所有患者术前1月均未口服或鼻喷抗组胺类及抗生素类等药物,排除肿瘤、免疫缺陷等全身性疾病,排除鼻窦单纯囊性变、真菌性鼻窦炎等。本研究经山东大学齐鲁医院医院伦理委员会审核并批准,研究的目的及方法均已向患者及家属说明,均签署参与本研究的知情同意书。本实验采用HE染色检测鼻息肉组织的一般形态特征和炎性细胞的浸润情况;应用免疫组化S-P法检测自噬相关LC3-B、P62蛋白表达情况;采用实时定量反转录聚合酶链反应(quantitativereal-timePCR,RT-PCR)技术检测自噬相关LC3-B、P62基因mRNA表达的情况。采用SPSS21.0软件进行统计学分析,P<0.05为差异具有统计学意义。结果:1、HE染色结果:服用甲泼尼龙治疗前的CRSwNP患者息肉组织粘膜表面被覆假复层纤毛柱状上皮,粘膜下见结缔组织呈明显疏松状态,细胞高度水肿,可见组织间隙内腺体增大明显伴增生,血管管腔增宽。与之形成明显对比,经甲泼尼龙治疗后患者鼻息肉组织可见明显好转,主要表现为上皮水肿减弱,嗜酸性粒细胞及中性粒细胞浸润均可见大幅度减少。2、免疫组化染色结果①各组间LC3-B蛋白的表达差异:在对照组、NP(-GC)及NP(+GC)高表达率为分别为 75.00%、13.10%和73.68%。LC3-B在NP(-GC)与NP(+GC)之间(P<0.05)、在对照组与NP(-GC)之间(P<0.05),差异有统计学意义;②各组间P62蛋白的表达差异:在对照组、NP(-GC)及NP(+GC)高表达率为分别为 20.00%、71.05%和 23.68%。P62 在 NP(-GC)与 NP(+GC)之间(P<0.05),在对照组与NP(-GC)之间(P<0.05),差异有统计学意义。3、RT-PCR检测自噬相关基因mRNA水平及变化:①LC3-B mRNA 的表达情况:NP(-GC)组为 1.009±0.4583,NP(+GC)组为 2.685±0.5284,对照组为 3.291±0.8650。两两比较:LC3-B 在 NP(-GC)与NP(+GC)之间(P<0.05)、在对照组与NP(-GC)之间差异有统计学意义(P<0.05)。②P62mRNA 的表达情况:P62mRNA:NP(-GC)组为 2.2175±0.4974,NP(+GC)组为 0.4617±0.1367,对照组为 0.4775±0.3270。两两比较:P62在NP(-GC)与NP(+GC)之间(P<0.05),在对照组与NP(-GC)之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1、鼻息肉组织自噬相关LC3-B基因及蛋白较正常对照组表达下调,P62表达上调,说明鼻息肉组织自噬水平降低,自噬可能参与了鼻息的发生;2、甲泼尼龙作用后,息肉组织中自噬相关LC3-B基因及蛋白表达上调,P62表达下调,自噬水平升高,说明甲泼尼龙能够通过上调息肉组织的自噬水平来治疗鼻息肉。表明自噬是激素干预的靶点,并且针对自噬的治疗策略可能为治疗鼻息肉提供新的治疗方法。