目的 建立并论证激素非依赖性LNCaP前列腺癌细胞亚系模型,并对其发生机制进行探讨。内容 长期在去激素的血清环境下培养LNCaP细胞,培养出能够适应无激素环境的LNCaP-AI细胞亚系。利用MTT、RT-PCR、荧光免疫方法对LNCaP-AI细胞系在无激素环境下的增殖能力和本身表达及分泌PSA的能力进行验证。运用RT-PCR和Western bloting方法检测LNCaP-AI细胞系AR、NKX3.1基因和Bcl-2、Bax、Akt、p-Akt蛋白的表达情况。流式细胞仪检测激素撤退对LNCaP前列腺癌细胞周期分布的影响。结果LNCaP前列腺癌细胞在无激素中培养3个月后逐渐适应了无激素的环境,成为激素非依赖的LNCaP-AI细胞亚系。LNCaP-AI细胞能够在无激素的环境下迅速增殖,能够分泌PSA,但其本身表达PSA的水平是LNCaP细胞的44%。LNCaP-AI细胞和LNCaP细胞AR、NKX3.1基因和Bax、Akt蛋白的表达水平无明显差异。LNCaP-AI细胞Bcl-2、p-Akt蛋白的表达明显高于LNCaP细胞。激素撤退可引起LNCaP细胞G1期阻滞。结论 激素非依赖性的LNCaP-AI前列腺癌细胞亚系,可以模拟前列腺癌由激素依赖发展为雄激素非依赖的过程,是理想的激素非依赖前列腺癌的细胞模型。激素撤退可引起LNCaP细胞G1期的积累。Bcl-2、p-Akt的升高,Bcl-2/Bax比例的增加,可能是激素敏感的前列腺癌获得抵抗激素剥夺治疗的能力的重要原因。