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外部信息通过爬行纤维和苔状纤维传入小脑皮层后,调节神经元活动,参与运动调节和运动学习,可是有关外部相关信息在哺乳动物小脑皮质中传递的细胞、突触以及动力学机制还不明确。因此,本研究应用局部场电位记录结合药理学技术,研究小鼠小脑皮质颗粒层和分子层对感觉刺激三叉神经的场电位反应特征,明确感觉刺激诱发小鼠小脑皮层颗粒细胞层和分子层场电位反应动力学特征及药理学机制。实验选用6-8周龄的昆明小鼠,经腹腔注射剂量为1.3g/kg的乌拉坦麻醉后,在小脑Crus Ⅱ小叶进行开颅术,开孔直径约为1.5毫米,仔细除去该部位硬脑膜后,用泵给暴露部位的脑表面持续灌流人造脑脊液;面部刺激选用一定压力的瞬间吹风刺激刺激相同侧胡须垫(5-500ms,50-60psi),刺激装置由电脑和膜片钳记录软件控制MASTER-8,并且与电生理信号记录同步进行;场电位记录部位选用颗粒与分子层,在记录的电极内部灌装20-30u1人工脑脊液,电极电阻大概为4-6MΩ;通过美国产膜片钳之放大器Axopatch-200B及Clampfit10.3数据收集软件记录面部刺激诱发颗粒和分子层的场电位反应;电生理实验数据分析采用膜片钳数据分析软件(版本10.3)。各组数据均用《均数±标准误》来表示,样本数用n表示。相关数据的统计学的分析应用SPSS软件(版本16.0),采用paired-T检验比较均数,当P小于0.05时,可以认为有显著性差异。本实验有如下结果:(1)在乌拉坦麻醉下,吹风刺激小鼠同侧触须垫可诱发分子层产生场电位反应,表现为如下波形:(1)N1,瞬间负极性波;(2)P1,大的正极性波,N1平均的振幅值为0.13±0.06mV, P1平均振幅值为0.36±0.08mV。反应潜伏期的平均值为13.21±0.32ms。吹风刺激结束可以诱发场电位反应(P2),但需要刺激时间大于60ms。(2)A型GABA受体(GABAA)的阻断剂一方面完全地阻断了P1,并出现了N2,也就是第二个负波,表明信息经PF传人后产生N1,浦肯野细胞被抑制后产生由GABAA受体介导的P1, GABAA受体的活性被阻断后,面部刺激导致浦肯野细胞兴奋并出现了N2。(3)吹风刺激可诱发小脑Crus II区颗粒细胞层产生场电位反应,当刺激持续时间为5-10ms时,可诱发单峰场电位反应。当刺激持续时间大于30ms时,吹风刺激诱发双峰反应,第一个峰值(N1)为刺激开始反应,其振幅的平均值为0.82±0.06mV,具有“全和无”特征。第二峰值(N2)为刺激结束反应,其振幅随着刺激持续时间的增加而增大。(4)小脑皮质颗粒层对面部刺激的反应表现为很高的反应频率特性,刺激频率从1Hz-33Hz的刺激串,可诱发颗粒细胞层反应,但随着刺激频率的增高,在第一个反应后可出现不同程度的反应压抑现象。刺激频率大于4Hz时,第二个反应开始振幅显著减小(P<0.05)。(5)脑表面灌流TTX完全阻断感觉刺激诱发颗粒细胞层场电位反应,N1峰值降至给药前的4.6±1.31%(P<0.001)。本实验结论:颗粒细胞层对感觉信息的传递具有高频、高保真特性,可精确反应刺激的开始和结束信息,对高频刺激反应存在反应压抑现象;与颗粒层相比,分子层对高频刺激敏感性低、保真性较差,对信息的传递具有明显的整合与延迟作用。