【摘 要】
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用花生球蛋白大亚基41kD多太的多克隆抗体对花生种子发育中期的cDNA表达文库进行筛选,得到三个阳性克隆,分别为p:1、pL4和pL6.测序后,对三个序列进行同源性比较,结果显示它们
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用花生球蛋白大亚基41kD多太的多克隆抗体对花生种子发育中期的cDNA表达文库进行筛选,得到三个阳性克隆,分别为p:1、pL4和pL6.测序后,对三个序列进行同源性比较,结果显示它们分属两类来源不同的cDNA,其中L1分属一类,L4和L6分属另一类.在GenBank中对三个序列进行同源性搜索,发现三个序列与花生致敏原1的两个cDNA（p17和p41b）同源性非常高,在将三个序列与花生致敏原1的两个cDNA进行同源性比较之后,结果显示它们分属两类来源不同的cDNA.其中L1与p17分属一类,L4、L6和p41b分属另一类.这一结果与60.5kD多肽抗体筛选文库得到的cDNA序列分类类似.在分别对60.5kD多肽抗体和41kD多肽抗体筛选出的cDNA序列W5与L1进行5’末端的扩增、拼接之后,分析了它们的阅读框,发现它们采用了与花生致敏原p17p一致的开放阅读框.根据W5拼接后的序列设计引物依次扩增出DNA序列Aral以及其上游序列,并拼接成一个DNA序列,比较了拼接后序列与花生致敏原1p17的cDNA的关系,显示花生致敏原1p17的cDNA来源于拼接后序列.对拼接后序列的上游345bp范围内的序列进行分析,发现这个区域内含有多个与基因表达调控有关的特异性元件以及数量元件,包括1个类似G盒的元件aaCACGTac.
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