自噬与凋亡机制在crotoxin诱导的K562和MCF-7细胞死亡中的相互作用

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目的:研究自噬与凋亡机制在crotoxin诱导的K562(高酪氨酸蛋白激酶活性)和MCF-7(caspase-3缺陷)细胞死亡中的相互作用。 方法:采用MTT法筛选敏感瘤株,结合LDH漏出率检测不同抑制剂对crotoxin抑瘤作用的影响;应用MDC荧光染色、透射电镜观察给药后自噬和凋亡的发生以及细胞超微结构的变化;采用ApoAlertTM、western blot、免疫荧光法研究自噬与凋亡在K562和MCF-7细胞死亡中的分子机制。 结果:Crotoxin可抑制K562和MCF-7细胞生长,诱导自噬及凋亡发生;抑制凋亡可减弱crotoxin对K562的抑瘤作用,抑制自噬可增加crotoxin对K562的细胞毒性,降低其对MCF-7的细胞毒性,中高浓度cathepsins抑制剂增强crotoxin对MCF-7的生长抑制,低浓度减弱之;给药后K562细胞线粒体膜电位下降、cyto-C释放,抑制自噬可使K562细胞caspase-3活化时间大大提前,crotoxin还可促进MCF-7细胞AIF向核内转移,提高cathepsin B、D、L的蛋白水平。 结论:自噬与凋亡在crotoxin诱导的K562和MCF-7细胞死亡中作用不同,凋亡主导了K562细胞死亡,而自噬促进了MCF-7细胞死亡。线粒体介导了死亡信号通路中自噬与凋亡的相互作用。
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