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肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上最常见的恶性程度很高、发展极为迅速、呈浸润性生长、在早期发生转移、且预后极为不佳的恶性肿瘤之一。目前其治疗手段主要以手术切除为主,但其恶性程度高且极易转移和复发,所以手术根治性切除治疗的疗效差。细胞粘附性在肿瘤细胞中的异常表达是肿瘤转移和复发的极为重要因素。目前,对细胞粘附分子的研究已经成为了解肝细胞癌细胞的侵袭与转移的比较可靠途径。钙粘连蛋白是一种钙依赖的介导同源细胞与细胞之间相互粘附的粘连糖蛋白的家族。研究表明,钙粘连蛋白在细胞的伸展和移动,细胞的信号传导与活化,细胞的生长及分化,细胞粘附,细胞识别以及调控组织器官发生等生理活动中起到了重要的作用,甚至在创伤后的愈合和肿瘤转移等病理活动中的作用也非常显著。因此钙粘连蛋白的活动出现异常后,细胞的粘附功能就会发生改变,导致出现其功能的紊乱,从而使细胞结构和功能发生改变,导致异常。本实验将LI-cadherin-SiRNA转染至肝癌细胞Hep3B,观察RNA干扰抑制肝肠钙粘连蛋白的表达对肝癌细胞Hep3B粘附和迁移能力的影响。目的：研究Ll-cadherin对肝癌细胞株Hep3B生长、粘附和迁移能力的作用。方法：建立LI-cadherin-SiRNA转染的肝癌细胞Hep3B,并观察转染效率；利用RT-PCR和Western blot检测转染后肝癌细胞Hep3B中Ll-cadherin表达的变化；MTT法检测Ll-cadherin对肝癌细胞生长和粘附的作用,Boyden小室侵袭实验检测肝肠粘连蛋白对肝癌细胞迁移的作用。结果：1、通过荧光倒置显微镜观察三组肝癌细胞,可以发现转染SiRNA后肝癌细胞Hep3B中发出了清晰的绿色荧光,说明转染已经成功。并计算出发出荧光的细胞在全部细胞中所占的比例,从而得出转染的效率为80%,这个结果符合本实验的相关要求。2、经过RT-PCR和Western-blot蛋白印迹检测三组细胞肝肠钙粘连蛋白mRNA和蛋白表达显示：阴性对照组和空白对照组细胞之间无明显的差异(P>0.05), SiRNA转染组肝肠钙粘连蛋白基因和蛋白的表达均显著低于阴性对照组和空白对照组，而且其差异有统计学意义(P<0.05)。3、通过MTT方法分别检测发现：肝肠钙粘连蛋白SiRNA转染组在12h和24h与阴性对照组和空白对照组比较无差异(P>0.05),在36h转染组生长高于阴性对照组和空白对照组,但是在统计学上无显著性差异(P>0.05),48h和72h肝肠钙粘连蛋白SiRNA转染组细胞株生长明显加快,而阴性对照组和空白对照组生长变缓,SiRNA转染组生长速度明显高于阴性对照组和空白对照组,具有统计学意义(P<0.05)。4、通过MTT检测方法显示,三组细胞粘附的OD值和细胞的数量分别为：SiRNA转染组0.655±0.040,57.00±6.39；阴性对照组0.795±0.050,75.67±8.21；空白对照组0.821±0.026,79.33±4.32。SiRNA转染组显著低于阴性对照组和空白对照组(p<0.01),阴性对照组和空白对照组的差异比较无统计学意义(P>0.05)。5、Boyden小室迁移实验显示三组穿膜的细胞数分别为：肝肠钙粘连蛋白SiRNA转染组87.83±8.59；阴性对照组67.50±8.50；空白对照组68.33±7.50。SiRNA转染组的穿膜的细胞数显著低于阴性对照组和空白对照组,且其差异具有统计学意义(p<0.01),阴性对照组和空白对照组之间的差异无统计学意义(p>0.05)。结论：1、成功将LI-cadherin-SiRNA干扰载体转染入肝癌细胞Hep3B中。2、LI-cadherin-SiRNA可抑制肝癌细胞株Hep3B中Ll-cadherin基因和蛋白的表达。3、LI-cadherin可抑制肝癌细胞株Hep3B的生长,增加肝癌细胞Hep3B的粘附力,抑制其迁移的能力。