研究背景和目的:寨卡病毒（Zika Virus,ZIKV）属黄病毒科黄病毒属,是一种蚊媒传播病毒。大多数病毒感染者无明显症状或发展为登革热样的自限性发热疾病。2015年爆发的巴西寨卡病毒疫情表明ZIKV感染可能会引发新生儿小头症和吉兰-巴雷综合征等严重神经系统并发症。然而,寨卡病毒特殊的传播模式给抗病毒药物和疫苗的开发带来极大挑战。至今未有获批上市的特异性治疗药物或预防疫苗,因此,迫切需要开发高效低毒的抗病毒药物。《本草纲目》记载丹参有活血祛瘀、通经止痛等功效。丹参中活性成分众多,其中部分丹参单体已被报道具有抗病毒效果,未见到丹参单体作用于ZIKV的研究报道。丹酚酸A和隐丹参酮分别是丹参中的水溶性和脂溶性代表成分之一,均具有抗菌消炎、抗肿瘤和神经保护等生物学活性。本课题拟研究丹酚酸A和隐丹参酮的抗寨卡病毒活性及机制,并进一步探讨丹酚酸A和隐丹参酮对天然免疫信号通路的影响,以期从中医药宝库中发掘安全有效的抗寨卡病毒药物,为解决目前寨卡病毒无药可用的问题提供一个药物候选。研究方法:1.采用MTT实验评价化合物的细胞毒性,CPE抑制结合ELISA实验筛选具有抗寨卡病毒活性的丹参单体化合物;2.采用qRT-PCR、western blot、间接免疫荧光以及噬斑实验测定丹酚酸A和隐丹参酮的体外抗寨卡病毒活性;3.四种给药方式、time of drug addition实验检测丹酚酸A和隐丹参酮作用于寨卡病毒的生命周期,抗病毒吸附和抗病毒进入实验检测丹酚酸A和隐丹参酮对寨卡病毒吸附及进入的影响,灭活病毒实验研究丹酚酸A和隐丹参酮是否能直接灭活寨卡病毒;4.Western blot实验检测丹酚酸A和隐丹参酮对天然免疫信号通路的影响;qRT-PCR检测丹酚酸A和隐丹参酮对炎症因子和干扰素刺激基因转录激活的影响;5.采用MTT、qRT-PCR以及western blot等实验测定丹酚酸A和隐丹参酮对其他病毒的抑制活性。实验结果:1.从1 1个丹参单体化合物中筛选出5个具有抗寨卡病毒活性的单体,分别是丹酚酸A、丹酚酸C、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和二氢丹参酮Ⅰ,其中丹酚酸A是选择性指数最大的丹参水溶性单体,CC50和IC50分别为125.90±7.15 μM和12.94±2.07 μM,隐丹参酮是选择性指数最大的丹参脂溶性单体,CC50和IC50分别为35.09±1.65 μM 和 5.49±0.40 μM;2.丹酚酸A和隐丹参酮抑制寨卡病毒基因及蛋白的表达,减少子代病毒的数量;3.丹酚酸A作用于寨卡病毒生命周期的多个阶段,包括直接杀灭病毒、抑制病毒的吸附进入及进入后的复制阶段;隐丹参酮抑制寨卡病毒进入后的复制阶段;4.寨卡病毒感染诱导细胞产生IFN-β并激活JAK/STAT信号通路,丹酚酸A和隐丹参酮处理显著下调STAT1/2磷酸化,减少下游干扰素刺激基因的转录激活;5.丹酚酸A下调PI3K/Akt信号通路;6.除寨卡病毒外,丹酚酸A还可抑制甲型流感病毒（IAV）、人免疫缺陷病毒（HIV-1）及单纯疱疹病毒（HSV-1/HSV-2）的复制;隐丹参酮对2型登革热病毒（DENV-2）和IAV均有抑制活性。实验结论:丹参单体化合物丹酚酸A和隐丹参酮具有良好的体外抗寨卡病毒活性;丹酚酸A作用于寨卡病毒生命周期的多个阶段,隐丹参酮则抑制寨卡病毒进入后的复制;丹酚酸A和隐丹参酮下调JAK/STAT信号通路发挥抗炎作用;丹酚酸A通过下调PI3K/Akt信号通路抑制寨卡病毒复制;丹酚酸A和隐丹参酮对多种病毒有抑制活性,具有成为广谱抗病毒药物的潜力。