卵巢癌的发生率在妇科恶性肿瘤居第三位,但它的死亡率却是第一。这由于卵巢位于盆腔深部,大多数的患者发病时的早期症状不明显,故及时发现并给予有效的治疗很困难,约60%-70%的卵巢癌患者确诊时已经是临床晚期。目前晚期卵巢癌的治疗以肿瘤细胞减灭术,联合化疗为主的综合治疗。近年来,虽然紫杉醇和铂类药物的应用,使得卵巢癌的五年生存率有所提高,但由于卵巢癌细胞对铂类药物的耐药,晚期卵巢癌极易复发,使得其五年生存率仍然徘徊在20%-30%左右。现在卵巢癌是威胁女性健康的最主要的妇科肿瘤之一,因此寻找一种能够增加卵巢癌细胞对顺铂敏感性的方法成为现在研究的热点之一。研究显示,肿瘤的出现、进展不仅与细胞无限生长相关,还与细胞凋亡受到遏制相关联。细胞增殖与凋亡的平衡失调,导致肿瘤的发生发展,因此诱导更多的肿瘤细胞凋亡,可能会延缓肿瘤的进展。细胞内caspase-3的表达增多是顺铂诱发肿瘤细胞凋亡的方式。Samc基因是一种促进细胞凋亡的基因,在其指导下合成的Smac蛋白能发挥诱发细胞凋亡的功能,肿瘤细胞内它的高表达,借增多caspase-3的表达,诱使大量的肿瘤细胞凋亡,使恶性肿瘤的进展得到推迟。SmacN7蛋白是人工合成的拟Smac蛋白类似物,保持着Smac蛋白的天然生物活性。本研究用细胞免疫化学SP法、四甲基偶氮唑蓝法、平板克隆形成实验,探讨SmacN7蛋白能否增加人卵巢癌细胞对顺铂的敏感性及可能的作用机制,从而临床治疗晚期卵巢癌提供理论依据。目的探讨拟线粒体促凋亡多肽N7(SmacN7)蛋白能否增加人卵巢癌细胞对顺铂的敏感性以及与Caspase-3蛋白表达的的关系。方法1.研究对象：体外培养的对数期生长的人卵巢癌SKOV-3细胞。2.研究方法：以不同浓度的SmacN7蛋白联合顺铂及单独应用顺铂作用于体外培养的人卵巢癌SKOV-3细胞,细胞免疫化学SP法研究各组处理48h后SKOV-3细胞胞浆中Caspase-3蛋白的表达情况；24小时、48小时、72h小时后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法研究细胞的增殖水平；平板克隆形成试验研究对该细胞克隆率的影响。3.统计学方法：SPSS17.0统计软件对数据进行单因素方差分析,计数资料的统计分析采用采用卡方检验,spearman法分析其相关性,计量资料数据均采用均数±标准差(X±S)表示,多组间比较采用方差分析。显著性水准a=0.05。结果1.SmacN7联合顺铂应用后,Caspase-3蛋白的表达比单独应用顺铂时明显增加(x2=40.663rs=0.45P=0.000).2.顺铂单独应用时,24h、48h、72h的细胞增殖抑制率分别为(6.15+1.12)%、(13.52±1.15)%及(29.31±1.07)%。SmacN7联合顺铂应用时,50μg／L、100μg／L、200μg／L,增加SmacN7浓度或者延长作用时间,细胞增殖抑制率显著增加,24h、48h、72h后增殖抑制率分别为(9.26±1.73)%、(29.24±2.08)%、(48.97±2.09)%;(24.82±2.11)%.(43.12±1.72)%、(66.12±2.25)%;(43.95±1.23)%,(72.18±1.74)%、(81.97±2.17)%。SmacN7联合顺铂应用后,SmacN7抑制SKOV-3细胞的功能依赖时间和浓度两方面的增加。增加SmacN7的浓度(50、100、200μg／L)和延长(24小时、48小时、72小时)作用时间,细胞增殖抑制率显著增加。同一浓度不同时间点细胞增殖抑制率比较差异有统计学意义(P<0.05)；同一时间不同浓度细胞增殖抑制率比较差异也具有统计学意义(P<0.05)。3. SmacN7联合顺铂应用时,50-200μg／L,随着SmacN7浓度的增加,SKOV-3细胞的克隆率分别为(21.17±0.55)%、(18.23±0.54)%、(15.27±0.56)%。单独应用顺铂时,SKOV-3细胞的克隆率为(25.13±0.52)%。随着SmacN7浓度(50、100、200μg／L)的增加,细胞克隆形成率逐渐降低,经统计学分析差异具有统计学意义P<0.05)。结论1.人卵巢癌SKOV-3细胞浆中Caspase-3蛋白的表达增加,是引起体外培养的人卵巢癌SKOV-3细胞株对顺铂敏感性增加的原因。2. SmacN7联合顺铂应用后,能够使体外培养的人卵巢癌SKOV-3细胞的增殖抑制率升高,细胞的克隆率降低。