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禽毛滴虫(Trichomonas gallinae)是寄生于鸽及其他鸟类口腔、咽、喉等上消化道的一种寄生性原虫,鸽是其最主要的宿主。禽毛滴虫可感染不同品种和年龄段的鸽,其中幼鸽和青年鸽最易感,最常见的特征性病变是口咽部形成溃疡或淡黄色干酪样物质,引起呼吸困难、采食障碍、腹泻、消瘦、甚至死亡。目前,禽毛滴虫的检测主要依靠传统形态学方法,虽然该方法方便快捷、价格低廉,但依赖于具备专业知识背景的操作人员,且在虫体感染数量较少时会出现漏检,更难以区分不同的毛滴虫种类。近年来,分子生物学技术广泛应用于寄生虫的病原检测,显示出了高效、准确等优点。为了明确陕西省部分地区信鸽禽毛滴虫的感染情况,本研究首先基于ITS1-5.8S r RNA-ITS2基因建立了特异性禽毛滴虫PCR检测方法,并利用该方法对陕西5个地区的9家公棚的267份信鸽咽拭子中禽毛滴虫的感染情况进行了调查,获得了如下结果:1.建立了基于ITS1-5.8S r RNA-ITS2基因的禽毛滴虫特异PCR检测方法:本研究以禽毛滴虫ITS1-5.8S r RNA-ITS2基因为靶基因,通过设计特异PCR引物、优化扩增体系和反应条件并进行敏感性和特异性验证等试验建立了禽毛滴虫特异性的PCR检测方法,特异性扩增出长度约310 bp的目的片段,禽毛滴虫DNA样品的最低检出量为0.56 pg,且对艾美尔球虫、贝氏隐孢子虫、微小隐孢子虫、蓝氏贾第虫、毕氏肠微孢子虫、芽囊原虫的DNA扩增时无条带出现。进一步利用常规形态学检测、体外培养检测和PCR三种方法对14份信鸽咽拭子样品进行检测,结果表明,三种方法的禽毛滴虫检出率分别为35.71%(5/14),42.86%(6/14),50.00%(7/14),提示本研究建立的禽毛滴虫特异性PCR检测方法优于其他两种方法。2.利用所建立的特异PCR方法调查了陕西部分地区信鸽禽毛滴虫的感染情况并解析了其种群结构:本研究采集了陕西省西安市高陵区、渭南市富平县、宝鸡市扶风县和凤翔区、咸阳市杨陵区的9家信鸽公棚的267份新鲜咽拭子样品,常规形态学方法检测发现这些样品中存在禽毛滴虫的感染,显微镜观察到长为7~11μm、宽为2~9μm的梨形或卵圆形的呈钟摆状、转圈状或波浪状运动着的透明虫体,其前端有4根游离的鞭毛,后端有突出虫体的轴突,周围有自前端发出到虫体后半部的波动膜。特异PCR检测发现这些样品中禽毛滴虫的总感染率为53.93%(144/267);不同地区信鸽的禽毛滴虫感染率差异极显著(P<0.01),其中扶风感染率最高(74.62%,97/130),其次为杨陵(70.91%,39/55)、凤翔(11.76%,2/17)、富平(11.54%,3/26),而高陵感染率最低(7.69%,3/39);序列分析发现共存在4个ITS1-5.8S r RNA-ITS2基因型,分别是ITSOBT-Tg-1型、ITS-OBT-Tg-2型、ITS-OBT-Ttl型和Ⅲ型,其中ITS-OBT-Tg-1型在本研究中为优势基因型,占38.19%(55/144),分布于杨陵、扶风两地;其次为ITS-OBT-Tg-2基因型,占32.64%(47/144),分布于杨陵、扶风、凤翔、富平4个地区;ITS-OBTTtl基因型占比最少(6.94%,10/144),仅在咸阳杨陵发现;从宝鸡扶风县分离鉴定的Ⅲ型虫株占比为22.22%(32/144),该基因型在国内尚未见报道。综上所述,本研究基于ITS1-5.8S r RNA-ITS2基因位点建立了特异性禽毛滴虫PCR检测方法,并初步应用于临床检测。同时,通过形态学及所建立的PCR方法阐明了陕西省部分地区信鸽公棚的禽毛滴虫感染情况和种群结构特征。这些研究结果为禽毛滴虫病的诊断及鉴别提供了技术支持,也为探究禽毛滴虫病的流行病学特征及有效防控提供了基础数据。