【背景】乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，侵袭、转移是影响乳腺癌病程发展的重要因素。Rab23分子最早在小鼠的裂脑缺陷（obp，open brain phenotype）中发现[1]，属于Ras小GTP酶超家族成员，除了与脑、骨骼、四肢等的发育有关外[2]，它还参与调控细胞的囊泡运输，促进了肝脏、胃等肿瘤的侵袭和转移[3]。前期我们课题组运用RT-PCR技术、免疫荧光化学技术检测出三种人乳腺癌细胞MDA-MB-231、Bcap-37、MCF-7和正常乳腺细胞HBL-100中均有Rab23的表达[4]，同时，运用质粒转染和RNAi技术、克隆形成实验、MTT实验、BrdU掺入实验、流式细胞技术和RT-PCR技术检测出在人乳腺癌细胞MDA-MB-231、Bcap-37、MCF-7中Rab23能够在体外抑制乳腺癌细胞的生长和增殖，同时能够降低Hedgehog信号通路的激活状态[5]。但是，Rab23分子是否与乳腺癌的侵袭、转移有关尚不清楚。因此，本课题旨在研究Rab23在乳腺癌细胞Bcap-37中的侵袭、迁移和增殖作用，为乳腺癌的防治提供新靶点。【目的】1.检测Rab23在乳腺细胞和乳腺癌细胞中的表达水平，选择合适的细胞系，通过慢病毒转染法构建稳定过表达和沉默Rab23的乳腺癌细胞系。2.探讨Rab23在体内、外对人乳腺癌细胞Bcap-37细胞侵袭、迁移的影响。3.探讨Rab23在体内、外对人乳腺癌细胞Bcap-37细胞增殖的影响。【方法】1.运用Western blot方法检测乳腺细胞HBL-100及乳腺癌细胞Bcap-37、MDA-MB-231、MCF-7中Rab23的表达。2.构建Rab23/GV278和Rab23/GV248表达质粒，采用慢病毒转染法转染人乳腺癌细胞Bcap-37，通过筛选后建立稳定的Rab23过表达细胞系Rab23/GV278-widetype和沉默细胞系（Rab23/GV248-RNAi#1， Rab23/GV248-RNAi#2，Rab23/GV248-RNAi#3）。3.运用Western blot方法检测Bcap-37细胞在过表达和沉默Rab23后Hedgehog信号通路激活水平重要标志分子Gli1的表达。4.运用划痕愈合实验、细胞Matrigel侵袭实验检测Rab23对Bcap-37细胞体外迁移侵袭的影响。5.运用裸鼠体内转移实验检测Rab23对Bcap-37细胞体内转移的影响。6.运用MTT实验和平板克隆形成实验检测Rab23对Bcap-37细胞体外增殖的影响。7.运用裸鼠皮下成瘤实验检测Rab23对Bcap-37细胞体内增殖的影响。【结果】1. Western blot检测显示，Rab23在乳腺和乳腺癌细胞系中均有表达，且Bcap-37细胞表达水平最高，与HBL-100细胞相比，差异有统计学意义（P＜0.01）。2.建立了稳定高表达和沉默Rab23乳腺癌Bcap-37细胞系。Western blot检测显示，过表达Rab23的Bcap-37细胞Gli1表达水平明显降低（P＜0.05），沉默Rab23的Bcap-37细胞Gli1表达水平明显升高（P＜0.05）。3.划痕愈合实验结果显示，与空载体Bcap-37细胞相比，过表达Rab23的Bcap-37细胞迁移能力明显增强（P＜0.01），沉默Rab23的Bcap-37细胞迁移能力明显减弱（P＜0.01）。4.细胞Matrigel侵袭实验结果显示，与空载体Bcap-37细胞相比，过表达Rab23的Bcap-37细胞侵袭迁移能力明显增强（P＜0.01），沉默Rab23的Bcap-37细胞侵袭迁移能力明显减弱（P＜0.01）。5.裸鼠体内转移实验结果显示，过表达Rab23组的Bcap-37细胞肿瘤转移能力明显增强（P＜0.05），空载体组和沉默Rab23组的Bcap-37细胞均未见肺转移；而在肝脏中均无转移。6. MTT实验结果显示，与空载体的Bcap-37细胞相比，过表达Rab23的Bcap-37细胞增殖能力明显减弱（P＜0.01），沉默Rab23的Bcap-37细胞增殖能力明显增强（P＜0.01）。7.平板克隆形成实验结果显示，与空载体的Bcap-37细胞相比，过表达Rab23的Bcap-37细胞克隆形成数量明显减少（P＜0.05），沉默Rab23的Bcap-37细胞克隆形成数量明显增多（P＜0.01）。8.裸鼠皮下成瘤实验结果显示，与空载体的Bcap-37细胞比较，过表达Rab23的Bcap-37细胞成瘤体积明显减小（P＜0.01），沉默Rab23的Bcap-37细胞成瘤体积明显增大（P＜0.01）。【结论】1. Rab23在乳腺癌细胞中均有表达，在Bcap-37细胞中表达水平最高。2. Rab23能够在体外促进人乳腺癌细胞Bcap-37的侵袭和迁移，并在体内促进肺转移。3. Rab23能够在体内、外抑制人乳腺癌细胞Bcap-37的增殖。