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目的:线粒体DNA(mtDNA)缺乏组蛋白保护,其损伤修复系统也不完善,因此,它是各种致癌物作用的特异性靶分子。关于癌细胞mtDNA形态、数量及功能变化的研究已有报道,但至今还没有发现mtDNA与细胞癌变直接相关的有力证据。因此,需要深入了解mtDNA突变和细胞癌变的相关性。
方法:在建立了改良一步法制备外周血白细胞mtDNA的基础之上,进一步采用聚合酶链反应(PCR)产物直接测序方法,对17例中国汉族肺癌患者外周血白细胞mtDNA苏氨酸转运核糖核酸(tRNAThr)、脯氨酸转运核糖核酸(tRNAPro)基因及D-环(D-loop)高变I区(HVR I)序列进行了分析,并与14例中国汉族健康成人外周血白细胞mtDNA相应区域序列进行对比。
结论:改良一步法是一种快速实用、重复性好的外周血白细胞mtDNA提取新方法;肺癌病人外周血白细胞mtDNA编码区序列趋于高度保守,主要碱基变异发生在mtDNA非编码HVR I,与健康成人相应区域的变异率趋于一致,但小细胞癌病人外周血白细胞mtDNA非编码HVR I碱基平均变异率有增高趋势;mtDNA第16 223核苷酸位点T和第16 362核苷酸位点C很可能是中国汉族人的特异性单核苷酸多态性(SNP)位点。