1,25(OH)2D3对MCD饮食诱导的大鼠非酒精性脂肪肝作用的实验研究

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目的:非酒精性脂肪性肝病是一类可诱发多系统病变的综合性疾病,据全球流行病学调查显示,各国各地区中NAFLD发病率均有不同程度上升。NAFL作为NAFLD发生发展的初始阶段,若不及时给予医疗干预,将逐渐进展为NASH、NASH相关性肝硬化、甚至诱导肝细胞发生癌变,终将严重危害人类健康。1,25(OH)2D3作为维生素D3的活性形式,其生理功能除参与钙磷代谢外,最新研究发现NAFLD患者血清中维生素D缺乏,给予补充维生素D后,成年及儿童患者的组织学及肝酶均有明显改善。然而,1,25(OH)2D3能否改善肝脏脂质沉积及其作用通路尚未明确。本研究中,我们利用MCD饮食诱导大鼠NAFL模型,同时给予1,25(OH)2D3干预,探索1,25(OH)2D3能否减轻NAFL模型的肝脏脂质沉积及其可能途径。方法:26只雄性SD大鼠随机分为对照组(MCS组)、模型组(MCD组)和干预组(MCD+1,25(OH)2D3组),干预组给予3ng/100g/d的1,25(OH)2D3花生油溶液灌胃,余两组分别给予3ml/Kg/d花生油灌胃,实验第4周末,下腔静脉取血检测ALT和AST,观察肝脏大体形态,取同一部位肝组织行油红O及H&E染色以观察组织病理学改变,检测肝脏TG、SOD及MDA含量;RT-PCR法检测各组肝组织中脂质代谢途径关键酶—FAS、ACC1、CPT1α、AOX、FAT/CD36、LFABP、APOB、MTTP及氧化应激指标—PRDX1、PRDX6的基因转录水平;WB检测蛋白相对表达量。结果:1.油红O染色及HE染色均可见MCD组肝组织内存在大量脂滴空泡,干预组则明显减轻。2.MCD组肝脏TG含量明显升高,干预组肝脏TG含量显著降低(P<0.05)。3.MCD饮食4周后,MCD组大鼠血清ALT(P<0.05)、AST(P=0.25)水平上升,干预组大鼠血清ALT(P<0.05)、AST(P<0.05)含量则显著降低。4.MCD组肝脏SOD含量显著降低(P<0.01),肝脏MDA含量明显升高(P<0.05);干预组SOD(P=0.29)、MDA(P<0.05)含量均有改善。5.氧化指标PRDX6基因转录水平在模型组可见明显降低(P<0.05),干预组则明显升高(P<0.05)。6.模型组CPT1α、AOX、APOB、MTTP基因转录水平显著降低(P<0.05),证明NAFL模型构建成功。7.模型组肝脏脂质代谢关键酶FAS、ACC1及FAT/CD36基因转录水平显著升高(P<0.05),干预组ACC1及FAT/CD36基因转录水平可见明显改善(P<0.05)。8.模型组FAT/CD36、ACC1蛋白表达量显著升高(P<0.01),1,25(OH)2D3干预组则明显降低(P<0.05)。结论:1,25(OH)2D3减轻了MCD饮食诱导的大鼠肝脏脂质沉积,可能是通过抑制FAT/CD36、ACC1的表达以及减轻肝脏脂质过氧化两个方面来实现的。
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