脂肪酶的固定化及其酶学性质研究

来源 :齐齐哈尔大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:shenxiaoxia123
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脂肪酶(Lipase,EC3.1.1.3)是一种催化能力较为多样性的酶,广泛应用于各行各业,但由于其难与产物分离,因此无法重复利用。脂肪酶的固定化由于能够保持酶的稳定性和重复使用性,受到人们广泛关注。固定化酶最主要的问题是载体用量大,固定化酶的寿命短。鉴于此,本文以改性硅藻土与自制壳聚糖微球为载体,固定化脂肪酶,找到固定化最佳条件、研究固定化脂肪酶的酶学特性,并对比了两种固定化酶在酯交换中的应用效率。本文主要工作如下:1.采用焙烧法先对硅藻土进行改性,在高温环境下,硅藻土表面羟基会发生对硅藻土吸附性有很大影响的转化,通过脂肪酶吸附量大小比较出450℃为最佳焙烧温度,再用碱浸法对硅藻土进行提纯。利用扫描电子显微镜对自制的二次改性硅藻土外貌形态、颗粒直径进行了表征,实验结果表明二次改性硅藻土孔径通透、排列规整,是吸附法固定化酶的良好载体。以戊二醛为交联剂,采用反相悬浮法自制壳聚糖微球,制得的壳聚糖微球尺寸均匀、成球性较好、骨架完整,具备交联法固定化酶的条件。2.采用单因素实验方法,以改性硅藻土,壳聚糖微球为载体,筛选出脂肪酶固定化的最佳条件。3.对自制的两种固定化酶与游离脂肪酶的酶学性质进行比较。脂肪酶经过固定化后耐热性、pH稳定性、热稳定性均有所提高,使固定化酶在工业生产中具有一定意义。4.以自制的两种固定化酶催化餐饮废油合成酯类,无论从使用寿命和转化率上改性硅藻土固定化酶效果均优于壳聚糖微球固定化脂肪酶。
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