20世纪90年代以来,免疫层析技术因其快速、简便、经济、单人份检测等特点得到迅速发展,已经广泛应用于医学检测、食品质量监测、毒品检测和环境监测。目前,免疫层析技术朝着高灵敏度、定量和多元检测的方向发展,并且有可能成为病原体、恶性肿瘤以及心血管疾病等的早期有效和灵敏的筛查诊断技术。但是传统的以胶体金为标记物的免疫层析试纸条灵敏度不够高,无法满足早期诊断中的超微量检测的需求。随着纳米技术的不断发展,许多新型的纳米材料被不断制备,而且被应用于免疫分析,给研发新一代诊断试剂盒带来了新的机遇。荧光量子点是一类非常重要的功能纳米材料,其直径约为1-10纳米。由于尺度量子效应,它们表现具有独特的光致发光性能。主要表现为:发射波长范围窄,Stocks位移大,量子产率高,荧光寿命长,化学和光学稳定性好。由于吸收光谱重叠范围宽,可采用单一波长的激光为激发光源,实现多色标记,特别适合于活体细胞成像和多组分同时检测。基于这些理由,我们研制以量子点为标记物的免疫层析试纸条与配套的定量检测分析仪。仪器设计方面:本文选用LED环形紫外冷光源作为激发光源,CCD模拟摄像机配合图像采集卡进行荧光信号采集,成功地大幅缩减了生物免疫层析分析仪的体积,为开发单片机控制的便携式精确检测仪奠定了基础。本文采用Borland Delphi来开发仪器配套的软件系统,成功实现了图像采集,图像处理,快速自动诊断,手动调整检测区域,打印检测报告等功能,并建立了完善的病人信息数据库,可以进行病人信息的录入,查询和统计。免疫层析实验方面:本文采用1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐(EDC)活化本实验室自制的CdTe量子点并偶联人葡萄球菌蛋白A(SPA),成功制备出粒径为2.5nm且分散良好的免疫量子点。在此基础上,构建免疫层析试纸条检测抗HIV-1 gp41抗体,并与金标试纸条在层析速度、灵敏度和老化等指标上进行了比较。实验证明各项指标均优于金标试纸条,且由于在紫外激发下量子点发射荧光,而血红蛋白无荧光,所以该方法在血清样本的检测中不会像金标法那样受到血红蛋白颜色的影响。用本文开发的层析分析仪检测不同浓度试纸条上控制线和检测线的荧光信号,证明其检测下限可以达到1 ng/mL,批内稳定性良好,批间差在可控范围内。