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目的观察海参糖胺聚糖(hGAG)对体外培养的人卵巢癌细胞株(SKOV-3)增殖及凋亡的影响,以探讨hGAG抑制肿瘤生长的机制。方法以不同浓度hGAG处理体外培养的SKOV-3细胞,用倒置相差显微镜观察细胞生长状态及形态变化,采用四唑盐比色试验(MTT法)测定细胞增殖情况及计算hGAG对细胞增殖的抑制率,应用流式细胞术PI荧光单染法检测细胞周期的改变,AnnexinⅤ/PI荧光双染法测定细胞凋亡率,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记方法(TUNEL)原位观察hGAG对细胞的凋亡作用。结果倒置相差显微镜下可观察到实验组随着药物浓度的增加(0.0001~1.00mg/mL),细胞数量逐渐变少,密度降低,细胞之间空隙加大,部分细胞呈悬浮状态;贴壁生长的细胞体积不等,形态不一,长梭形细胞逐渐增多,细胞轮廓增强。当hGAG达高浓度时细胞密度更小,细胞之间空隙更大,正常形态细胞少见。MTT法结果显示与阴性对照组相比hGAG在0.0001~1.00mg/mL浓度下,OD值改变均具有显著性差异(P≤0.01)。并且随着药物浓度增大抑制率表现出增加趋势,当浓度为1.00mg/mL时,24h抑制率可达到53.70%;流式细胞术PI荧光单染法检测结果显示1.00mg/mL hGAG处理细胞24h后,G1期细胞百分率增加(P≤0.05),S期细胞百分率降低(P≤0.05),细胞周期阻滞于G1期;AnnexinⅤ/PI荧光双染法结果显示当hGAG浓度为1.00mg/mL时,24h时凋亡率为9.55±3.07%(P≤0.05),其中早期凋亡的细胞为8.66±2.47%(P≤0.05);TUNEL方法检测hGAG(0.0001、0.01、1.00mg/mL)作用SKOV-3细胞24h后在显微镜下可观察到呈蓝黑色的阳性凋亡细胞,并且随着药物浓度增加,凋亡指数也明显增加,1.00mg/mL浓度时凋亡指数为22.67±4.01%(P≤0.01)。结论hGAG能够显著抑制SKOV-3细胞的增殖,并可能通过作用于细胞周期、诱导细胞凋亡发挥抗肿瘤活性。