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本课题主要以体外培养的雄性SD大鼠Leydig细胞为研究对象,研究镉对Leydig细胞的影响,同时研究硒对镉毒性的拮抗作用。选用成年雄性SD大鼠,用Ⅰ型胶原酶消化、密度梯度离心法纯化获得Leydig细胞,检测细胞存活率及纯度。结果显示:本方法所获得的Leydig细胞存活率达到90%以上,纯度达到93%以上,符合试验要求。将Leydig细胞进行原代培养,细胞贴壁稳定生长之后,染镉培养18h,测定细胞存活率、细胞脂质过氧化水平以及Leydig细胞内睾酮生成酶活性水平,以此判断镉对Leydig细胞的影响。结果显示:(1)和对照组比较,染镉组的细胞存活率降低,而且随着镉剂量的加大,细胞存活率呈下降趋势;(2)染镉能够降低细胞SOD的活性、睾酮生成酶活性水平,MDA含量增高,而且高剂量组引起的变化更为明显;(3)低剂量(5μmo/L)的镉引起细胞GSH-Px活性的上升,高剂量的镉使细胞GSH-Px活性下降,而且加大镉的剂量,细胞GSH-Px活性下降幅度也同样增加。同时以不同浓度的硒和镉联合染毒培养Leydig细胞,测定细胞存活率、细胞脂质过氧化水平以及Leydig细胞内睾酮生成酶活性水平,以此来研究硒对镉毒性的拮抗作用。结果显示:(1)和单纯染镉组比较,低剂量硒镉联合作用下细胞存活率上升,但高剂量的硒镉作用同样能降低细胞存活率;(2)和单纯染镉组比较,低剂量的硒能提高中低剂量镉作用下的细胞SOD的活性和睾酮生成酶活性水平,降低MDA含量;对高剂量镉作用下的细胞SOD的活性、睾酮生成酶活性水平和MDA含量影响不大;相对高剂量的硒反而能够降低镉作用下的细胞SOD的活性、睾酮生成酶活性,增加MDA含量;(3)和单纯染镉组比较,中低剂量的硒能够提高细胞GSH-Px活性,高剂量的硒能加强镉对Leydig细胞的毒性作用,使细胞GSH-Px活性下降。本研究结果证实了镉对SD大鼠Leydig细胞的影响,以及硒能够对镉毒性产生拮抗作用。镉对体外培养SD大鼠Leydig细胞有毒性作用,此毒性作用能够通过细胞的存活率、脂质过氧化水平和细胞内睾酮生成酶活性水平的改变而表现出来。而且低剂量的镉对睾丸间质细胞的毒性作用能够被适当剂量的硒所拮抗,但高剂量的硒不但不能拮抗镉的毒性作用,又能和镉产生协同作用。硒拮抗镉的毒性作用和硒的剂量有关,而且和二者的相对浓度有关。