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2008年我国发生三聚氰胺污染牛奶的中毒事件,引起了全国对三聚氰胺毒性,以及对食品安全性的高度关注。本次研究从三聚氰胺急性毒性、亚慢性毒性、特殊毒性以及对细胞凋亡的影响进行了全面评价,旨在为可能食用三聚氰胺人群造成的危害,以及中毒治疗、中毒机制的研究提供参考依据。研究分成以下4个部分：1.三聚氰胺急性毒性及蓄积毒性研究分别采用改良寇氏法和固定剂量染毒法,评价三聚氰胺对小白鼠灌胃急性毒性和蓄积毒性。试验结果显示,小白鼠急性中毒症状为活动减少,呼吸急促,食欲降低等；染毒动物除肾脏有病理变化外,动物肺、肝及脾均有眼观损害及组织病理学变化；小白鼠经口急性毒性LD50为2958.69mg/kg, LD5095%可信限为2187.00-3981.07 mg/kg。蓄积毒性试验结果显示,蓄积系数K为4。参照我国食品安全性急性毒性分级标准,三聚氰胺为低毒物质,可造成肾、肺、肝及脾等内脏器官的损害,且有中度蓄积毒性。2.三聚氰胺的亚慢性毒性研究亚慢性毒性研究分为小白鼠30天喂养试验和大白鼠90天喂养试验。小白鼠30天喂养试验分为三聚氰胺高剂量组为(49.3mg/kg.bw/d),中剂量组为(19.7mg/kg.bw/d),低剂量组(3.0 mg/kg.bw/d),空白对照共4组,每组20只小白鼠,试验观察周期为30天。试验结果显示,染毒组小鼠体增重缓慢,食物总利用率极显著降低(P<0.01)；高剂量组淋巴细胞、单核细胞与对照组比较显著升高(P<0.05)；高、中剂量组小鼠谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、肌酐和尿酸值显著高于对照组(P<0.05),钙和磷显著低于对照组(P<0.05)；高剂量组小鼠肝、肾指数显著高于对照组(P<0.05),高、中剂量组脾指数显著低于对照组(P<0.05)；高、中剂量组小鼠肺、肝、脾、肾及膀胱有病理变化,低剂量组和对照组无明显的组织病理变化。以上结果说明了三聚氰胺亚慢性毒性会影响小白鼠生长发育,会造成肝肾生化功能的损害,能造成动物肝、肾、肺、及脾的病理损害。大白鼠90天喂养试验分为高剂量组(16.44mg/kg.bw/d),中剂量组(6.57mg/kg.bw/d),低剂量组(1 mg/kg.bw/d),及空白对照组,每组20只动物,试验观察周期为90天。试验结果显示,各剂量组大鼠体重增长缓慢,食物利用率显著减少(P<0.05)；高剂量组和中剂量组谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素氮、肌酐和尿酸显著升高(P<0.05)；各剂量组血常规指标与对照组比较无显著差异；病理检查结果显示,三聚氰胺各剂量组存在小鼠肾、肝、肺、脾、膀胱的损伤。在90天亚慢性试验中,三聚氰胺影响大白鼠生长,高、中剂量会造成对血液生化指标的影响,并对肝、肺、脾、膀胱有损伤。3.三聚氰胺特殊毒性研究此部分包括三聚氰胺骨髓细胞微核试验,三聚氰胺精子畸形试验,三聚氰胺致畸胎性试验。三聚氰胺的小白鼠骨髓细胞微核试验分为高剂量组(1479.35 mg/kg.bw),中剂量组(591.74 mg/kg.bw),低剂量组(295.87 mg/kg.bw),环磷酰胺阳性对照组(60 mg/kg.bw)和阴性对照组(蒸馏水)。染毒分为2次染毒,中间间隔24h。试验结果显示,阳性对照组微核极显著高于阴性对照组(P<0.01),各剂量组微核率与阴性对照组无差异性。以上结果表明三聚氰胺在本试验设计剂量下未见致突变作用。三聚氰胺的小白鼠精子畸形试验分为高剂量组(1479.35 mg/kg.bw).中剂量组(591.74 mg/kg.bw)、低剂量组(295.87 mg/kg.bw),环磷酰胺阳性对照组(60 mg/kg.bw)和阴性(蒸馏水)对照组,每组10只小鼠。分5次经口给予三聚氰胺,在给予受试物第35天处死动物,检测精子形态。结果显示,阳性对照组精子畸形率极显著高于阴性对照组(P<0.01)；高剂量组,中剂量组小鼠精子畸形率显著高于阴性对照组(P<0.05)。结果表明三聚氰胺对雄性动物有生殖毒性。三聚氰胺致畸胎性试验分为高剂量组(98.2 mg/kg.bw/d).中剂量组(39.4mg/kg.bw/d)、低剂量组(19.7 mg/kg.bw/d),阴性对照组(蒸馏水)和阳性对照组(60mg/kg.bw/d)环磷酰胺,每组20只。试验结果显示,三聚氰胺对孕鼠的健康状况、行为、增重和生殖机能无明显影响；对胎鼠的生长发育无明显影响；对胎鼠的外观、骨骼和内脏无致畸作用。在98.2 mg/kg.bw/d～19.7 mg/kg.bw/d剂量范围内,三聚氰胺对小鼠无胚胎毒性和致畸毒性。4.三聚氰胺对小白鼠不同组织细胞凋亡研究三聚氰胺对昆明小鼠肾、肝、脾和肺细胞凋亡研究分为高剂量组(1479mg/kg.bw),中剂量组(739 mg/kg.bw),低剂量组(370 mg/kg.bw),以及蒸馏水空白对照组。给药36小时后收集肾,肝,脾和肺样本,采用流式细胞仪进行检测。结果显示,三聚氰胺各剂量组肾和肺细胞凋亡率显著高于对照组。当剂量为1479mg/kg.bw～370 mg/kg.bw时,三聚氰胺诱导肾细胞和肺细胞的凋亡。