【摘 要】
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该研究利用来源于拟南芥中编码3 β-羟化酶的(3β-hydroxylase)GA4基因,构建植物表达载体pME524-G,通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草;用携带有菜豆几丁质酶(Chitinase)基因和
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该研究利用来源于拟南芥中编码3 β-羟化酶的(3β-hydroxylase)GA4基因,构建植物表达载体pME524-G,通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草;用携带有菜豆几丁质酶(Chitinase)基因和烟草β-1,3-葡聚糖酶基因的双价载体pBLGC转化兰州百合(Liliumdavidii var.),并对转基因植物进行了检测,其结果如下:1.构建了植物表达载体pME524-G.从携带有拟南芥GA4基因的克隆载体Bluescript(GA4A)中,酶切获取长度为1.2Kb目的片段,将目的片段构建到含有35S启动子和NOS终止子的植物表达载体pME524,获得含有GA4基因的重组表达载体pME524-G.GA4基因构建于35S启动子之下,抗生素筛选标记为NPTII基因.2.建立了GA4基因的与转化体系并对烟草进行转化.3.对转基因烟草进行分子生物学鉴定和遗传学分析.获得的抗性植株经过PCR检测和DNA斑点杂交得到阳性结果.4.对转基因烟草进行了形态学分析.通过对T1代幼苗的根长比较,表明转基因烟草与野生型相比幼根生长速率快.5.建立了百合植株芽分化的最佳培养体系.用百合鳞茎的不同取材部位及不同激素配比,进行百合芽诱导培养基筛选.6.建立了双价载体pBLGC的转化体系并对转化植株进行分子生物学鉴定.
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