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本研究以火炬松第一代种子园27个自由授粉家系为试验材料,运用已建立的近红外模型测定其产脂量、木材密度和纤维长度。自主研发了一套火炬松年轮分析系统,运用该系统测定火炬松年轮宽度。利用基于REML和BLUP的混合线性模型方法,分析了火炬松产脂量、材性性状、年轮宽度的生长变异规律,进而分析各性状之间的表型与遗传相关,估算各性状的遗传参数,同时预测了家系和单株的育种值,筛选出优良家系和优良单株,丰富火炬松育种材料。
以拥有共同母本的50个火炬松子代单株和46个火加松杂交子代单株为遗传材料,进行RNA转录组测序。根据NCBI火炬松转录组数据,运用生物信息学分析,评估火炬松RNA转录组测序的可行性。构建火炬松RNA转录组测序文库,运用Mapdisto软件构建功能基因图谱,运用WinQTLCart软件作关联分析,对火炬松功能基因进行解析和注释。主要研究结果如下:
(1)产脂量、木材密度、纤维长度的家系方差分量达到了显著水平,各性状存在显著的遗传差异,具有较大的选择潜力。其中产脂遗传力为0.45,木材密度遗传力为0.44,火炬松的产脂力、木材密度、纤维长度的遗传力较大,可进行优良家系的选育,为火炬松遗传改良提供优良材料。
(2)各性状之间存在显著的相关,产脂力与材性性状在表型上存在中等水平相关,在遗传上存在弱相关;与生长性状在表型及遗传上均存在弱相关,胸径与产脂力相关性比树高的相关性大。木材密度和纤维长度的表型及遗传相关系数分别为0.99和0.91。
(3)将家系入选率定为20%,个体入选率定为1%。各性状均有5个家系入选,各性状根据育种值共选择出14个优良单株,该遗传材料丰富了育种群体,对火炬松第三轮育种工作具有重要意义。
(4)自主研制开发了火炬松木芯年轮分析装置及分析软件,该年轮分析软件适用于各版本Windows系统,运用Matlab软件设置参数,仅在Java环境下运行即可,不需要安装,操作方便,该火炬松年轮分析软件可以快速准确的判读火炬松各年轮及其早、晚材的宽度。
(5)火炬松早材生长量整体呈现逐年减少的趋势,晚材生长量整体呈现先增加后逐年减少的趋势,年轮宽度生长量整体呈现先增加后逐年减少的趋势。火炬松早材、晚材、年轮宽度年增长量的变异系数整体较大,可在3-5年期间对其进行早期选育。
(6)总早材的遗传力为0.38,误差为0.17,总晚材的遗传力为0.47,误差为0.20,总年轮宽度的遗传力为0.43,误差为0.18。与其他性状相比,早材的遗传力明显较低,表明早材更容易受到环境变异的影响。年轮宽度之间存在显著的表型与遗传相关,且与胸径、木材密度存在显著相关。早材相比较晚材和年轮宽度,与产脂量的表型与遗传相关较大。
(7)RNA转录组测序,50个火炬松单株共得到15681个功能基因,46个火加松单株共获得14147个功能基因。其中,约有40%的基因可以在火炬松全基因组中比对成功,约有60%的功能基因未在火炬松全基因组中发现。火炬松和火加松共有的基因序列有10659个,火炬松独有的基因序列为5022个,火加松独有的基因序列有3488个。
(8)当LOD=8,R=0.05时,构建的功能基因连锁图谱最佳,一共有863个连锁群,共有4986个基因在连锁群上,其中低密度的基因连锁群较多。因火炬松2N=24,因此我们筛选出12个火炬松群体高密度连锁群作为火炬松群体的功能基因图谱,全长1573.94cM,共有357个基因,两基因位点之间的距离平均值在5 cM之内。功能基因图谱与表型连锁分析,得到与产脂量相关的功能基因6,与木材密度相关的功能基因2个,与纤维相关的2个。根据基因序列在NCBI数据库上的比对结果,注释到238个与松脂合成相关的基因。
以拥有共同母本的50个火炬松子代单株和46个火加松杂交子代单株为遗传材料,进行RNA转录组测序。根据NCBI火炬松转录组数据,运用生物信息学分析,评估火炬松RNA转录组测序的可行性。构建火炬松RNA转录组测序文库,运用Mapdisto软件构建功能基因图谱,运用WinQTLCart软件作关联分析,对火炬松功能基因进行解析和注释。主要研究结果如下:
(1)产脂量、木材密度、纤维长度的家系方差分量达到了显著水平,各性状存在显著的遗传差异,具有较大的选择潜力。其中产脂遗传力为0.45,木材密度遗传力为0.44,火炬松的产脂力、木材密度、纤维长度的遗传力较大,可进行优良家系的选育,为火炬松遗传改良提供优良材料。
(2)各性状之间存在显著的相关,产脂力与材性性状在表型上存在中等水平相关,在遗传上存在弱相关;与生长性状在表型及遗传上均存在弱相关,胸径与产脂力相关性比树高的相关性大。木材密度和纤维长度的表型及遗传相关系数分别为0.99和0.91。
(3)将家系入选率定为20%,个体入选率定为1%。各性状均有5个家系入选,各性状根据育种值共选择出14个优良单株,该遗传材料丰富了育种群体,对火炬松第三轮育种工作具有重要意义。
(4)自主研制开发了火炬松木芯年轮分析装置及分析软件,该年轮分析软件适用于各版本Windows系统,运用Matlab软件设置参数,仅在Java环境下运行即可,不需要安装,操作方便,该火炬松年轮分析软件可以快速准确的判读火炬松各年轮及其早、晚材的宽度。
(5)火炬松早材生长量整体呈现逐年减少的趋势,晚材生长量整体呈现先增加后逐年减少的趋势,年轮宽度生长量整体呈现先增加后逐年减少的趋势。火炬松早材、晚材、年轮宽度年增长量的变异系数整体较大,可在3-5年期间对其进行早期选育。
(6)总早材的遗传力为0.38,误差为0.17,总晚材的遗传力为0.47,误差为0.20,总年轮宽度的遗传力为0.43,误差为0.18。与其他性状相比,早材的遗传力明显较低,表明早材更容易受到环境变异的影响。年轮宽度之间存在显著的表型与遗传相关,且与胸径、木材密度存在显著相关。早材相比较晚材和年轮宽度,与产脂量的表型与遗传相关较大。
(7)RNA转录组测序,50个火炬松单株共得到15681个功能基因,46个火加松单株共获得14147个功能基因。其中,约有40%的基因可以在火炬松全基因组中比对成功,约有60%的功能基因未在火炬松全基因组中发现。火炬松和火加松共有的基因序列有10659个,火炬松独有的基因序列为5022个,火加松独有的基因序列有3488个。
(8)当LOD=8,R=0.05时,构建的功能基因连锁图谱最佳,一共有863个连锁群,共有4986个基因在连锁群上,其中低密度的基因连锁群较多。因火炬松2N=24,因此我们筛选出12个火炬松群体高密度连锁群作为火炬松群体的功能基因图谱,全长1573.94cM,共有357个基因,两基因位点之间的距离平均值在5 cM之内。功能基因图谱与表型连锁分析,得到与产脂量相关的功能基因6,与木材密度相关的功能基因2个,与纤维相关的2个。根据基因序列在NCBI数据库上的比对结果,注释到238个与松脂合成相关的基因。