Shewanella oneidensis中细胞色素bd氧化还原酶第三小亚基CydX的发现及其功能探索

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hwhxl0
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
细胞色素bd氧化还原酶是一类常见于原核生物特别是一些病原菌中的呼吸链末端氧化酶。由于对氧气具有极高的亲和性,它往往成为细菌在微氧条件下生存繁殖所必需的酶类。该酶能够帮助细菌克服一定浓度范围内一氧化氮(NO)对细胞生长的抑制,从而帮助某些病菌逃避宿主的免疫制裁。Shewanella oneidensis MR-1是一种发现于水体环境中的革兰氏阴性兼性厌氧菌,能够利用多种无机和有机物作为电子受体,在微生物电池和环境修复方面具有应用前景。亚硝酸是环境中常见的无机物,一方面可作为电子受体被细菌所利用,另一方面却能抑制细胞的生长。细胞色素bd氧化还原酶作为MR-1在微氧条件下使用的主要酶,可以使MR-1细胞耐受较高浓度的亚硝酸。  MR-1中细胞色素bd氧化还原酶的编码基因cydAB后存在一个小基因so3284(cydX),该基因的缺失导致细胞失去对亚硝酸的耐受能力。异位回补该基因及其在E.coli中的同源物都能使细胞恢复对亚硝酸的抗性。我们因此假设CydX是细胞色素bd氧化还原酶的另一个亚基。RT-PCR结果表明该基因与cydAB处于同一个转录物上。与CydAB一样,CydX是一个镶嵌于细胞内膜上的跨膜蛋白,而我们的实验表明CydX采用了N端在细胞周质而C端在细胞质的跨膜构象。且双分子荧光互补(BiFC)实验表明CydX与CydAB在膜上形成复合体。这些结果印证了我们的假设。  我们随后着手探索CydX在细胞色素bd氧化还原酶复合体中所扮演的角色。GFP融合表达实验表明CydX的表达及其定位和整合于细胞膜都不依赖于CydAB;而CydAB复合体在膜上的形成也不依赖于CydX。一系列突变实验表明,CydX N端较为保守的跨膜区及其处于周质区的5肽对于其功能具有重要意义。有趣的是,即便是对最保守氨基酸的单点突变也未能影响细胞对亚硝酸的耐受能力,暗示单点突变不会影响CydX在细胞色素bd氧化还原酶复合体中的功能。由于CydX只存在于部分细菌的细胞色素bd氧化还原酶中,而迄今尚无细胞色素bd氧化还原酶晶体结构的报道,因而本研究对未来研究两类酶复合体结构和功能及两者之间的差异将有重要意义。
其他文献
耦合器是一种在微波通信领域具有广泛的应用的无源器件,具有提供信号的正交输出和功率分配等功能。双频微带线耦合器是近些年的研究热点,利用微带线实现的双频耦合器具有应用频
蛋白激酶C受体(receptor for activated C-kinase1,RACK1)是WD40蛋白超家族成员之一,在细胞信号转导途径中扮演着重要角色。目前大量的研究主要集中在动物RACK1的功能,对植物中R
目的:评价手术全期护理降低四肢骨折手术患者压疮的效果.方法:抽取本院2017年8月-2018年9月收治的60例四肢骨折手术患者作为研究对象,回顾60例患者临床资料,根据不同的护理方
目的:探讨分析预防老年股骨颈骨折患者的并发症护理措施.方法:将我院2016年8月-2017年8月接收的治疗的股骨颈骨折老年100例为研究对象.根据随机数字分配方法将其均分对照组和
目的:研究内固定术后护理和保守治疗后护理对肋骨骨折患者所取得的不同效果.方法:本文选择的研究对象为2017年3月-2018年10月收治的肋骨骨折患者,选择80例作为研究对象按随机
本论文研究了重组人可溶性肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF—related apoptosis inducing ligand,TRAIL)的毕赤酵母发酵工艺优化、蛋白纯化工艺及生物活性分析,并利用生物软
集成电路工艺发展到超深亚微米技术后,大规模集成芯片的工作频率越来越高,芯片内部的布局布线密度不断增大,高速互连中的信号噪声干扰日趋严重。如何抑制高速电路中的各类信号噪
本试验选择粒重差异显著的四个水稻品种,用称重法测定了颖果的鲜干重,采用微孔滤膜抽滤酶解细胞悬浮液的方法研究了胚乳细胞增殖动态,用光镜和电镜观察了颖果的结构及其胚乳细胞的充实情况,并鉴定了颖果中某些生理活性的变化,主要结果如下: (1)就同为大粒或小粒而言,籼稻发育快于粳稻,且籼稻前期发育快,干物质积累多;粳稻发育慢但持续时间长,最终籽粒较籼稻饱满;同一亚种间,小粒品种发育时间短,大粒品种发育
该实验室利用一株营养缺陷型菌株MFP7(h,adel-D25,ade6-M210,S65T-GFP∷caml,leu1-32,ura4-D18),通过观察细胞内GFP-CaM的荧光强度以分析胞内CaM的浓度及分布变化.该文发现增
科学家认为:人类的大脑的基本构架,在6岁就基本完成,所以学前教育尤为重要,开发幼儿智力,培养幼儿语言表达能力,发展幼儿认识事物能力还有幼儿的自制能力,意志能力,身心健康等等。常