山东省仔猪腹泻主要病原调查研究

来源 :青岛农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:regicide09
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试验主要从山东省5个地区的50例疑似猪源性致病性大肠杆菌病例中分离出的48株猪源性大肠杆菌进行O血清型鉴定、耐药性及致病性研究。O血清型鉴定试验结果表明:48株猪源性大肠杆菌分属14种血清型,其中,流行的主要血清型为O139(18.75%)、O119(16.67%)、O89(12.50%)和O20(12.50%),共29株,占定型菌株的60.42%。耐药性试验结果表明:48株猪源性大肠杆菌对青霉素类抗生素、四环素类抗生素和氯霉素类抗生素耐药严重,以四环素、卡那霉素、氯霉素、阿莫西林和链霉素最为严重,对头孢菌素类和氨基糖苷类抗生素敏感,以头孢唑啉、丁胺卡那霉素和菌必治最为敏感,各分离菌株均有不同程度的多重耐药性。致病性试验结果表明:48株猪源性大肠杆菌对小白鼠具有致病性。   根据Genbank中猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)和猪流行性腹泻病毒(PEDV)的基因组序列,结合两种病毒基因组结构特点,在对两种病毒基因序列进行同源性比较的基础上,选择二者的S蛋白基因为引物设计区,根据PCR引物设计原则,应用Primer5.0软件设计出TGEV和PEDV各两条引物。其中,TGEV的引物可扩增出212bp的特异片段,PEDV的引物可扩增出241 bp的特异片段。试验归纳出TGEV和PEDV单项RT-PCR体系的最优引物浓度和退火温度为:引物浓度,TGEV0.8-1.0μmol/L,PEDV1.0μmol/L,退火温度,TCEV54℃,PEDV58℃。对山东省不同地区的24例疑似病毒性腹泻病例进行RT-PCR技术诊断,结果TGEV阳性感染率为54.17%,PEDV阳性感染率为75.00%,TGEV和PEDV混合感染率为29.17%,基因测序结果表明同源率达99%以上。
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