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目的:了解青海省同德县藏族自然人群感染乙肝病毒(HBV)基因型、血清亚型分布特征,并初步分析基因型与临床类型之间的关系;了解青海省同德县藏族自然人群感染HBV核心基因启动子(BCP)T1762/A1764双突变、前核(PreC)A1896突变的分布状况并初步分析其与基因型、HBeAg状态、临床类型之间的关系。方法:选取2006年经青海同德藏族人群乙肝患病率调查发现的表面抗原(HbsAg)阳性的311份血清,通过提取核酸和巢式PCR扩增,获得HBV S和C基因片段并直接测序。使用DNASTAR软件,将样本HBV S基因和C基因测序结果与GeneBank中的HBV参考株比对并进行系统发生树分析,确定其基因型;依据样本S基因序列推导出其氨基酸序列,根据HBV包膜蛋白S上的共同抗原决定簇α与第122、127,160位氨基酸确定其血清亚型;以参考序列AB033556为标准,将样本C基因测序结果与之相比,确定是否发生BCP T1762/A1764双突变、PreC A1896突变。最后,使用SAS 8.0软件对结果进行统计分析,率的比较采用χ错误!未指定书签。2检验及Fisher确切概率法。结果:1、311例来源于自然人群的HBsAg阳性血清中,S基因扩增阳性304例,扩增阳性率为97.8%;扩增产物测序成功298例,测序成功率为98.0%。C基因扩增阳性296例,扩增阳性率为95.2%; C基因扩增产物测序成功283例,测序成功率95.6%。S、C基因均扩增阳性并测序成功的271例,占311例HBsAg阳性血清的87.1%。2、271例基因型可确定样本中,C/D重组型261例,占96.3 %,C型基因10例,占3.7 %;血清ayw2亚型259例,占95.6%,adr亚型10例,占3.7%,adw2亚型2例,占0.7%。C/D重组基因型中,男性128例,女性133例;C基因型中,男性4例,女性6例,不同基因型的性别构成没有差异(P=0.5745)。<15岁组、15～组、30～组、50～组中C/D重组基因型分别有54、95、90、22例,C基因型分别有4、4、1、1例,不同基因型年龄别构成亦无显著差异(错误!未指定书签。P=0.3261)。3、271例基因型可确定样本中,免疫耐受期慢性乙肝126例,其中C/D重组基因型119例,C基因型7例; HBeAg阳性的慢性乙肝32例,其中C/D重组基因型32例,C基因型0例;非活动性慢性乙肝90例,其中C/D重组基因型88例,C基因型2例;HBeAg阴性的慢性乙肝23例,其中C/D重组基因型22例,C基因型1例;不同基因型的临床类型构成没有差异(P=0.3862)。4、271例基因型可确定样本中,发生BCP T1762/A1764双突变的有56例,突变率为20.7%;其中,男性、女性分别为25、31,差异无统计学意义(P=0.4944);各年龄组人数分别为8、14、23、11,突变率随年龄增加而增高(P<0.005);C基因型与C/D重组型中分别为0、56,C/D重组型突变率高于C基因型( P=0.0294);HBeAg阳性者与HBeAg阴性者中分别为20、36,HBeAg阴性者突变率高于HBeAg阳性者(P<0.0001);免疫耐受期慢性乙肝、非活动性慢性乙肝、HBeAg阳性慢性乙肝、HBeAg阴性慢性乙肝者中分别为12、29、8、7,差别有统计学意义(P=0.0003),HBeAg阳性的慢性乙肝者BCP T1762/A1764双突变发生率高于免疫耐受期的慢性乙肝者(P<0.0001)。5、271例基因型可确定样本中,发生PreC A1896突变的有27例,占10.0%;男性、女性中分别为10、17,差异无统计学意义(P=0.201);各年龄组分别为5、10、8、4,差异没有统计意义(P>0.25);C基因型与C/D重组型中分别为0、27,差异无统计学意义(P=0.6053);HBeAg阳性者与HBeAg阴性者中分别为5、22,HBeAg阴性者突变率高于HBeAg阳性者(P<0.0001);免疫耐受期慢性乙肝、非活动性慢性乙肝、HBeAg阳性慢性乙肝、HBeAg阴性慢性乙肝中分别为4、21、0、2,差异有统计学意义(P<0.0001),其中非活动性慢性乙肝突变发生率高于免疫耐受期慢性乙肝(P<0.0001)。结论:青海省同德县藏族人群感染HBV基因型以C/D重组型为主,血清型以ayw2为主;青海同德藏族人群感染HBV BCP T1762/A1764双突变与PreC A1896突变流行程度相对较低;这两种突变与HBeAg阴性有关,BCP T1762/A1764双突变可作为预测该地区慢性乙肝病人结局的分子生物学标志。