小鼠卵母细胞体外成熟培养及体外受精研究

来源 :重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fish3321
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目的:研究FSH和卵丘颗粒细胞对体外成熟的卵母细胞核成熟与胞浆成熟的影响,研究在体外成熟的卵母细胞的受精能力。 方法:未成熟卵母细胞来自HMG刺激后的小鼠卵巢。所得GV期卵母细胞分成裸卵(DO)组和卵丘-卵母细胞复合物(COC)组,在分别添加0.1、0.5或1U/mL FSH的HTF培养液和不添加FSH的HTF培养液(对照组)中培养36h。培养过程中在倒置显微镜下观察各组卵母细胞生殖泡破裂(GVBD)和第一极体(PB1)出现。出现PB1的卵母细胞判为MⅡ期(核成熟)。出现PB1的卵母细胞部分用于荧光染色,在激光共聚焦显微镜下观察皮质颗粒(CG)的分布,从而判断胞浆成熟情况;部分用于体外受精,观察体外成熟的卵母细胞的受精能力。 结果:DO各FSH组与对照组的GVBD发生率及PB1排出率差别无显著性意义(P>0.05);COC各FSH浓度组比对照组COC有更高的GVBD发生率及PB1排出率(P<0.05);但各FSH浓度组间COC的GVBD发生率及PB1排出率差别 重庆医科大学硕士学位论文无显著性意义(P>0.05)。COC各组的GVBD发生率和FP排除率明显高于DO各组(P<0.05,P<0.01)。体外培养的MH期DO中CG均散布于胞浆中。COC对照组中MH期卵母细胞CG呈单层状排列于细胞膜下的比例低于各FSH浓度组COC(P<0.05),但各FSH组间比较,差异无显著性意义 (P>0.05)。体外成熟的DO未发现有受精者;0.IU/mL FSH组COC的受精率明显高于COC对照组(P<0.05)。 结论:1,卵丘细胞对卵母细胞的核和胞浆成熟均有重要作用。2.FSH对COC中卵母细胞核与胞浆成熟均有促进作用,其作用可能是通过颗粒细胞介导的。3.体外培养的卵母细胞胞浆成熟率低可能是受精能力低的主要原因。
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