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良性前列腺增生症(benign prostatic hyperplasia, BPH)是中老年男性的常见病,严重影响患者的身心健康和生活质量,我国正步入老龄化社会,其发病率逐年升高。该病的发病原因及机制尚不完全清楚,本研究从前列腺细胞雌、雄激素受体的表达、细胞增殖与凋亡及其相关基因蛋白、局部生长因子等几个方面,将表皮生长因子(epidermal growth factor ,EGF)和雌雄激素对小鼠前列腺生长影响及其机制作了深入研究,籍此探讨BPH发生的病因学。研究结果如下:1. EGF对小鼠前列腺生长的作用及其机制由河北医科大学实验动物中心饲养的雄性昆明种小鼠60只(合格证号:医动字第04056号)鼠龄为出生后22-27天,平均24.7天,体重15-20克,平均16.8克。随机分为3组,每组20只。分别为A组、B组和对照组。A组小鼠:皮下注射蒸馏水稀释后的EGF,2μg/只/天,连续注射至第28天断颈处死,剖腹取前列腺,称重后70%乙醇固定,4℃冰箱冷藏备用;B组小鼠:皮下注射蒸馏水稀释后的EGF ,1μg/只/天,连续注射至第28天,断颈处死,剖腹取前列腺,称重后70%乙醇固定,4℃冰箱冷藏备用;对照组:皮下注射蒸馏水,连续至28天,断颈处死,剖腹取前列腺,称重后70%乙醇固定,4℃冰箱冷藏备用。对上述各组动物,均取前列腺进行下述指标的观察:前列腺湿重,病理变化,雌激素受体(estrogen receptor, ER)、雄激素受体(androgen receptor , AR)、bcl-2、bax、c-myc 、表皮生长因子受体(EGF-receptor, EGF-R)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)表达以及细胞凋亡率和增殖率的变化。分别以精密天平称重,光镜观察前列腺病理变化,其余指标用流式细胞法(flow cytometry,FCM)进行定量分析。各定量分析指标中,凋亡率和增殖率用百分率(%)表示,ER、AR、bcl-2、bax、c-myc 、EGF-R、bFGF的表达以标记率(labeled rate)和表达量(expression <WP=5>level)表示,其中标记率以百分率(%)表示,表达量则以荧光道数(线性采集)表示其相对含量。所有数据均采用均数±标准差进行统计学处理。1.1 前列腺湿重的改变 A组59.400±8.750mg,B组38.200±4.320mg, 对照组22.100±4.960mg,三组间存在显著差异(P<0.01)。1.2 前列腺病理变化 实验组:大小剂量间无明显差别,腺体增生明显,少数腺体扩张成囊,形状不规则,内有分泌物潴留,细胞立方状;多数腺体的腺上皮增生明显,乳头状突起多而细长,细胞呈高柱状。对照组:正常前列腺有大小不等的腺体组成,腺腔呈圆或椭圆形,大小差别大,腺上皮呈单层柱状,腔内有较多染色分泌物。1.3 前列腺细胞雌、雄激素受体表达 ER的表达 (1)标记率:A组34.850±8.800,B组25.525±6.782,对照组17.638±5.877,实验组与对照组之间存在显著差异(P<0.01),两实验组之间无显著差异,(P>0.05); (2)表达量:A组5.204±0.160,B组4.713±0.353,对照组4.175±0.101,三组间差异有统计学意义(P<0.01)。 AR的表达 (1)标记率:A组35.012±6.292,B组33.612±10.589,对照组21.712±2.921,实验组较对照组明显升高(P<0.05),两实验组之间无显著差异(P>0.05);(2)表达量:A组6.433±0.488,B组5.990±0.427,对照组5.032±0.229,实验组较对照组明显升高(P<0.01),两实验组之间无显著差异(P>0.05)。1.4 前列腺细胞增殖、凋亡率的改变及相关基因的表达 增殖率改变 A组35.625±6.968,B组30.375±3.777,对照组26.309±2.020,A组与对照组差异明显(P<0.05),A组与B组及B组与对照组之间无统计学意义(P>0.05)。凋亡率改变 A组9.600±0.515,B组15.075±1.852,对照组21.950±1.584,三组间存在显著差异(P<0.01)。bcl-2的表达 (1)标记率:A组27.333±6.335,B组25.625±6.629,对照组13.520±1.715,实验组较对照组明显升高(P<0.01),两实验组之间无显著差异(P>0.05);(2)表达量:A组5.609±0.257,B组5.092±0.399,对照组4.226±0.333,三组之间存在显著差异(P<0.05)。bax的表达(1)标记率:A组31.875±9.144,B组25.600±6.507,对照组19.260±4.761,A组较对照组有显著差异(P<0.05),A组与B组及<WP=6>B组与对照组之间无明显差异(P>0.05);(2)表达量:A组5.746±0.305,B组5.733±0.222,对照组3.875±0.514,实验组较对照组明显升高(P<0.01),两实验组之间没有显著差异(P>0.05)。c-myc的表达 (1)标记率:A组30.363±9.148,B组26.417±4.547,对照组16.620±3.844,A组与对照组之间有显著差异(P<0.05);A组与B组及B组与对照组之间无明显差异(P>0.05); (2)表达量:A组5.723±0.899,B组5.331±0.252,对照组4.289±0.180,A组较对照组有显著差异(P<0.05);A组与B组及B组与对照组之间无显著差异(P>0.05)。1.5 前列腺细胞EGF、EGF-R、bFGF的表达EGF的表达 (1)标记率:A组30.200±5.528,B组24.863±11.357,对照组14.638±1.977,两实验组较对照组明显升高(P<0.05);两实验组之间无明显差异(P>0.05);(2)表达量:A组5.188±0.245,B组4.837±0.329,对照组3.628±0.346,两实验组较对照组明显升高(P<0.01);两实验组之间无显