论文部分内容阅读
本实验旨在研究妊娠期母体应激是否会对其子代肝脏胆固代谢产生影响以及其作用的调节。实验分为三个部分,第一部分研究妊娠期母猪热应激对仔猪生产性能及血液生化指标的影响。第二部分研究妊娠期母猪热应激对子代肝脏胆固醇代谢的影响。第三部分以SD大鼠为模型,研究母鼠妊娠期DEX处理以及添加菊粉对子代肝脏脂质代谢的影响及其调节作用。1妊娠期母猪热应激对仔猪生产性能及血液生化指标的影响本实验选取大白×长白初产母猪12头,随机将其分为:对照组（CON）6头母猪（18-22℃）,热应激组（HS）6头母猪（28-32℃）单栏饲养,记录仔猪初生体重、断奶体重等,采集血液、肝脏等,并分析子代各器官比重、血液生化指标以及子代肝脏甘油三酯及胆固醇含量。结果显示妊娠期母猪热应激对新生仔猪的肝脏、脾脏、肾脏、背最长肌、腰大肌、海马组织器官的比重没有明显影响。妊娠期母猪热应激使断奶仔猪的背最长肌比重极显著下降（P<0.01）,对肝脏、脾脏、肾脏、腰大肌组织器官的比重影响差异不显著。妊娠期母猪热应激使新生仔猪血清中胆固醇（CHOL）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）含量显著升高（P<0.05）,对高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、总胆汁酸（TBA）没有产生显著影响。妊娠期母猪热应激使断奶仔猪血清中HDL-C含量极显著降低（P<0.01）,TBA含量显著升高（P<0.05）,对CHOL、LDL-C含量没有产生显著影响。妊娠期母猪热应激对新生、断奶仔猪的肝脏胆固醇及甘油三酯影响不明显;新生仔猪的肝脏糖原影响不明显,断奶仔猪肝脏糖原有降低的趋势（P=0.06）。以上结果表明妊娠期母猪热应激使新生仔猪血清中CHOL、LDL-C含量升高,而使断奶仔猪血清中HDL-C含量降低,TBA含量升高,提示妊娠期母猪热应激对子代胆固醇代谢有影响。2妊娠期母猪热应激对子代肝脏胆固醇代谢的影响本实验旨在研究妊娠期母猪热应激对仔猪肝脏胆固醇代谢的影响,与CON组相比,新生仔猪肝脏中CYP7A1、FXR的mRNA表达水平显著降低（P<0.05）,CYP27A1的mRNA表达水平显著升高（P<0.05）;LDLR的mRNA表达水平极显著升高（P<0.01）;SR-B1的mRNA表达水平有上升趋势（P=0.08）。胆固醇合成的关键酶HMGCR蛋白表达水平显著升高（P<0.05）,但对SREBP2的蛋白表达水平没有影响。参与胆固醇分解CYP7A1、CYP27A1、LXR的蛋白表达水平显著升高（P<0.05）,同时FXR的蛋白表达水平极显著上升（P<0.01）。参与胆固醇逆转运的SR-B1（P=0.07）的蛋白表达水平有升高趋势,LDLR的蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。断奶仔猪肝脏中HS组的ApoE的mRNA表达水平显著上升（P<0.05）,FXR的mRNA表达水平极显著升高（P<0.01）。胆固醇合成的关键酶HMGCR蛋白表达水平没有显著影响。参与胆固醇降解的相关蛋白CYP7A1（P=0.07）、CYP27A1（P=0.07）的表达水平有升高趋势。SR-B1的蛋白表达水平极显著降低（P<0.01）,LDLR的蛋白表达水平极显著降低（P<0.01）。以上结果表明在母猪妊娠期热应激,促进了新生仔猪肝脏胆固醇降解及转运摄取的蛋白表达;使断奶仔猪肝脏胆固醇降解增加,逆转运与转运摄取受到抑制,胆汁酸合成增加。3母鼠妊娠期DEX处理和添加菊粉对子代肝脏脂质代谢的影响将妊娠SD大鼠（n=8）随机分为:对照组（CON）、地塞米松处理组（DEX）、地塞米松+菊粉处理组（Inulin）,实验于母鼠妊娠第13天开始处理,妊娠期19天采集胎鼠肝脏及母代鼠血液、肝脏、胎盘称重并记录。与CON组相比,DEX组母鼠体重显著下降（P<0.05）,肝体比显著升高（P<0.05）,母鼠肝脏中CHOL、TG含量显著升高（P<0.05）。DEX组肝重显著下降（P<0.05）,胎鼠肝脏中TG含量显著升高（P<0.05）;添加菊粉处理,Inulin组胎鼠重显著升高（P<0.05）,母鼠肝脏CHOL含量显著降低（P<0.05）。母鼠血清中ALT、AST、CHOL、TG、HDL-C、LDL-C含量都显著升高（P<0.05）;添加菊粉处理后,Inulin组CHOL、HDL-C含量显著下降（P<0.05）,LDL-C 含量有下降趋势（P=0.07）。母鼠妊娠期DEX处理使母鼠肝脏胆固醇胆固醇合成关键酶HMGCR蛋白表达水平显著升高,SREBP2 mRNA表达水平显著降低（P<0.05）。参与胆固醇降解经典途径的关键酶CYP7A1 mRNA表达水平显著升高,蛋白表达水平显著降低,LXR mRNA表达水平显著降低,蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,但肝脏胆固醇降解替代途径关键酶CYP27A1 mRNA表达。参与胆固醇转运相关基因LDLR mRNA表达水平显著升高,蛋白表达水平有升高趋势（P=0.08）。参与胆固醇逆转运相关基因ABCG1、ABCG5、ABCG8、ApoA1 mRNA 表达水平显著降低（P<0.05）,ABCA1 mRNA 表达水平有下降趋势（P=0.07）。添加菊粉处理后,Inulin组HMGCR mRNA表达水平显著升高,蛋白表达水平显著降低（P<0.05）。CYP7A1 mRNA表达、蛋白表达水平显著升高。ABCA1 mRNA表达水平有升高趋势（P=0.07）,LXR蛋白表达水平显著降低（P<0.05）,SR-B1蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。以上结果表明在母鼠妊娠期进行DEX处理,母鼠体重下降,血清中CHOL、HDL-C、LDL-C含量升高,肝脏中CHOL、TG含量升高,胎鼠肝脏中TG含量升高;添加菊粉后,母鼠血清中CHOL、HDL-C、LDL-C含量降低,肝脏中CHOL含量也降低。DEX组母鼠肝脏胆固醇合成转运增加,降解减少,逆转运也减少,添加菊粉后胆固醇分解增加,合成降低,逆转运水平升高,研究结果提示妊娠期添加菊粉可以显著缓解DEX应激造成的母体胆固醇升高。