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目的:通过观察通络糖泰方对高糖培养的SD大鼠施旺细胞（Schwann Cells,SCs）成髓化的影响,从而证实通络糖泰可促进髓鞘调控因子的表达,改善糖尿病周围神经病变的发生发展;同时研究高糖缺氧对背根神经节神经元（dorsal root ganglion neuron,DRGn）培养的最适条件,为糖尿病周围神经病变（Diabetic peripheral neuropathy DPN）的基础研究提供一定的科学理论依据。方法:1.选新生3-5d的SD大鼠,取坐骨神经,原代培养SCs,取第三代生长良好的SCs作为研究对象。用50mM高糖培养72h,建立DPN SCs模型。加入通络糖泰含药血清干预,在前期研究的基础上,通过Western Blot法检测髓鞘调控因子P0在高糖条件下的SCs 24h、48h、72h三个时间点的表达。2.选新生3d的SD大鼠,取背根神经节,原代培养背根神经节神经元,取生长良好的神经元作为研究对象。通过光镜下观察细胞形态、ROS表达法及CCK-8法检测0、6h、24h时间点不同浓度高糖、缺氧对DRGn的诱导损伤,以期建立DPN背根神经节神经元模型。结果:1.S-100免疫荧光鉴定SCs的纯度达90%以上,可进行下一步实验。Western blot检测提示,与对照组相比,培养24h,高糖组SCs P0蛋白表达值,差异无统计学意义（P>0.05）;培养48h、72h,高糖组SCs P0蛋白表达值降低,且随时间的延长其降低程度更明显,差异有统计学意义（P<0.05）、（P<0.01）;与高糖组相比,培养24h,2.5%、5%、10%、20%浓度通络糖泰血清干预高糖组SCs P0蛋白表达值,差异无统计学意义（P>0.05）:培养48h、72h,10%浓度通络糖泰血清干预后SCs P0蛋白表达值均升高,且随时间的延长其升高程度更明显,差异有统计学意义（P<0.05）、（P<0.01）;且5%与20%浓度通络糖泰血清干预后SCs P0蛋白表达仅在72h时间点升高,差异有统计学意义（P<0.05）;2.5%浓度通络糖泰血清干预高糖组SCs P0蛋白表达值,在各个时间点差异均无统计学意义（P>0.05）。2.得到生长良好的DRGn,β-tubulinⅢ免疫荧光鉴定的细胞纯度达到90%以上。细胞形态、ROS表达及CCK-8法摸索最佳高糖浓度为50mM,缺氧浓度为300uM及高糖缺氧浓度为50mM+300uM,培养最佳时段为24h。结论:1.采用植块法结合双酶消化法共同培养新生鼠SCs,阿糖胞苷+差速贴壁法进行纯化,S-100免疫荧光鉴定SCs的纯度达90%以上,原代培养方案可行。2.高糖可抑制SCs髓鞘调控因子P0蛋白的表达。3.通络糖泰可改善高糖对髓鞘调控因子P0蛋白表达的抑制作用,上调其表达,促进SCs成髓化,进而改善DPN髓鞘再生障碍的病理特征,防治DPN。4.采用改良的双酶消化法培养新生鼠DRGn,阿糖胞苷进行纯化,β-tubulinⅢ免疫荧光鉴定的细胞纯度达到90%以上,成功培养DRGn。5.50mM高糖、300uM COCL2以及50mM高糖+300uM COCL2可引起DRGn表型发生病理性变化、ROS出现表达及其活性被抑制,故此浓度的高糖、缺氧可作为诱导DPN DRGn模型。