【摘 要】
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目的：探讨纳米氧化锌对人脐静脉血管内皮ECV304细胞凋亡机制的研究。
方法：将不同浓度(0～400mg/L)纳米氧化锌作用于ECV304细胞24h后，采用龙胆紫染色倒黄显微镜观察细胞对纳
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目的：探讨纳米氧化锌对人脐静脉血管内皮ECV304细胞凋亡机制的研究。
方法：将不同浓度(0～400mg/L)纳米氧化锌作用于ECV304细胞24h后，采用龙胆紫染色倒黄显微镜观察细胞对纳米氧化锌的吞噬效应、核分裂指数和集落形成实验检测对细胞生长的影响；MTT法检测细胞活性；单细胞凝胶电泳检测细胞DNA的损伤情况；Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡；Hoechst33342/PI双染法观察细胞凋亡及坏死；荧光指示剂Fura-2/AM荧光分光光度法测定细胞内Ca2+浓度；荧光染料Rh123/PI结合流式细胞仪、荧光染料Rh123激光共焦显微镜及荧光光度计检测线粒体跨膜电位变化；分光光度法检测培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平，DCFH-DA荧光探针法测定细胞内ROS含量。
结果：纳米氧化锌可进入细胞内部，胞浆中可见黑色团块状物质，并且对ECV304细胞生长和有丝分裂有明显地抑制作用；细胞呈现典型凋亡形态；单细胞凝胶电泳可见明显的彗星状拖尾；细胞线粒体跨膜电位降低；纳米氧化锌使ROS含量增加，抑制细胞抗氧化酶SOD活性，使氧化产物MDA生成增加，处理组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)；细胞内[Ca2+]i明显升高(P<0.05)。
结论：纳米氧化锌能有效抑制ECV304细胞生长并且诱导其发生凋亡，其诱导凋亡的作用可能依赖于线粒体途径和氧化应激。
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