泽漆、枞酸钠灭螺效应及泽漆对钉螺毒性作用的研究

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第一部分泽漆、枞酸钠对钉螺的杀灭效果观察目的:观察泽漆乙醇提取物、枞酸钠对钉螺的杀灭效果。方法:泽漆乙醇提取物、枞酸钠分别用去氯水配成不同浓度的溶液,即100、200、400、800mg/L,共8种溶液,按照WHO推荐的“杀螺剂实验室终筛方法”中的浸泡方法进行浸杀灭螺试验,以氯硝柳胺和去氯水分别作为阳性和阴性对照。观察各组浸液浸泡1d、2d、3d、4d后钉螺的死亡率。结果:钉螺经两种药物作用后,其死亡率随着药物浓度的升高和时间的延长而递增,同一时间,同一浓度,枞酸钠的灭螺效果优于泽漆乙醇提取物。不同浓度泽漆乙醇提取物处理1d后,钉螺死亡率最高仅为10%,处理4d后,浓度为100mg/L时,其死亡率近50%;枞酸钠作用钉螺1d后,最低死亡率为45.5%,最高达100%,处理4d后,死亡率几乎均达100%,而去氯水对照组未见钉螺死亡。结论:泽漆乙醇提取物、枞酸钠均具有杀灭钉螺的作用,且枞酸钠杀螺效果明显优于泽漆乙醇提取物。第二部分泽漆乙醇提取物对钉螺糖原及蛋白含量的影响目的:研究泽漆对钉螺软体组织糖原、蛋白的影响,以探讨其灭螺机制。方法:钉螺经不同浓度泽漆乙醇提取物浸泡2d后,称量钉螺湿重、干重,并计算其干湿比;用蒽酮比色法和Bradford标准曲线法分别测定钉螺软体组织的糖原和蛋白质含量变化;分别以葡萄糖和BSA作标准曲线。结果:钉螺经不同浓度的泽漆乙醇提取物处理后,钉螺软体组织的重量均未见明显变化,其干重约为湿重的30%到35%之间;糖原含量显著下降,其下降幅度从18.64%到69.49%;蛋白含量也有所下降,下降幅度从3.06%到20.44%。结论:钉螺经泽漆提取物处理后,其糖原含量显著下降,蛋白含量也有所下降,而其重量变化不明显。第三部分泽漆乙醇提取物对钉螺肝脏组织和酯酶的影响目的:观察钉螺病理切片和SDS-PAGE电泳图谱,以研究泽漆灭螺机理。方法:泽漆乙醇提取物浸泡钉螺2d后,经固定、脱钙、水洗、梯度脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、烘干、脱蜡、HE染色、封片,光镜下观察并拍照;另挑选活钉螺取出软体组织,用磷酸盐缓冲溶液冰浴匀浆后,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测钉螺酯酶同工酶活性。结果:药物作用后,结果显示,药物浓度100mg/L时形态学无显著变化,200mg/L时组织边缘开始肿胀,绒毛减少,至800mg/L浓度组肝管壁及管腔已不复存在,形态发生较大改变。药物浓度越高,组织形态改变越大,且酯酶活性呈现出先升高后降低的趋势。结论:泽漆能够改变钉螺组织形态并能影响体内酯酶同工酶活性。
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