CBF1基因转化地被石竹及其抗寒性评价

来源 :河北农业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:echo1210
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本试验以地被石竹(Dianthus chinese)为试验材料,将从拟南芥(Arabidopsis)中获得的CBF1基因通过农杆菌(Agrohacterium)介导的叶盘法进行了遗传转化,并对其进行了PCR检测,获得了4个转基因株系。同时,对转基因植株的抗寒性——经低温胁迫,离体叶片的相对电导率、游离脯氨酸含量、丙二醛含量、超氧化物歧化酶的活性进行了初步的评价。以期获得抗寒性得到提高的转基因地被石竹。主要研究结果如下:1.对于获得的28个抗性株系进行了PCR检测,其中4个株系的DNA经扩增后产生了与阳性对照相同的特异扩增条带,其片段大小约为640bp。这初步表明外源基因已整合进地被石竹转化植株的基因组中。2.经低温胁迫后,随着温度的下降,叶片相对电导率呈“S”型上升趋势,转基因株系比对照株系(CK)的相对电导率在各温度下均较低;-20℃时对照株系的相对电导率的上升幅度最大,达到505.03%,而转基因株系27的上升幅度最小,为439.84%。-16℃时,CK与株系27差异极显著,CK与株系18差异显著;-20℃下,CK与株系27差异极显著,与株系12、18差异显著。3.对照植株在低温胁迫下,随着温度不断下降,脯氨酸含量上升幅度最大,达到了975.35%;各转基因株系12、18、25、27的脯氨酸含量上升幅度均小于对照株系,分别为823.01%、747.59%、568.59%和531.28%,转基因株系27最小。在各低温处理下,转基因株系27的脯氨酸含量比对照株系高出50%~200%。从-4℃到-16℃,各株系脯氨酸含量增幅都较大,均在100%左右,到-20℃时,增幅有所减小,降低到50%左右。4.经过不同低温处理后,各株系的丙二醛含量均有所增加。从0℃到-20℃,对照株系的丙二醛含量的增加量,各温度下分别为80.23%,12.14%,40.7%,39%以及33.42%,-4℃时增幅较大,其他温度下增幅比较平缓。转基因各株系在各温度下丙二醛的增长量相对较平缓,特别是从-8℃开始增长量只有20%左右。5.经过低温胁迫后,各转基因株系和对照株系的SOD活性表现为随着温度的上升而增加,到-12℃时达到高峰,在-16℃时SOD活性又有所下降,达到峰值时,各株系的SOD活性分别为7.7、14.67、15.21、12.32和15.87 U/g。-12℃时,CK与各转基因株系SOD活性差异极显著,各转基因株系之间SOD活性差异不显著。
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