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本文就SIRT1在肝癌细胞系Hep3B、PLC/PRF/5和Huh7的增殖、迁移，克隆形成和维持自我更新过程中的作用进行了初步研究。背景：SIRT1蛋白是一种烟碱腺嘌呤二核苷酸（NAD+）依赖性的Class III类组蛋白去乙酰化酶，属于诱导沉默调节子2（silent information regulator2, Sir2）家族的成员。在肿瘤细胞中，对SIRT1表达的调控主要在mRNA水平，而对SIRT1去乙酰化酶活性的调节主要通过蛋白-蛋白相互作用与类泛素化。SIRT1在多种实体瘤中高表达，通过直接靶向下游的相关因子起作用。SIRT1可调节凋亡相关因子，沉默抑癌基因，促进多药耐药基因（Mdr1）的表达，影响肿瘤的化疗和放疗的治疗效果。目的：利用慢病毒载体携带SIRT1的shRNA序列下调SIRT1在肝癌细胞系Hep3B、PLC和Huh7中的表达，研究SIRT1在肝癌细胞系Hep3B、PLC和Huh7中的相关功能。方法：首先构建携带SIRT1干扰序列shRNA的慢病毒载体pLKO.1-sh-SIRT1。将构建的载体转染HEK293T细胞，包装慢病毒Lv-sh-SIRT1。Western免疫杂交（Western blotting, WB）验证shRNA干扰序列的有效性，并构建SIRT1表达下调的细胞系。然后，利用CCK8试剂盒检测下调SIRT1的表达对细胞增殖能力的影响，通过transwell实验检测细胞迁移能力的改变，进而通过平板克隆形成实验和成球培养分别检测细胞克隆形成能力和细胞自我更新能力的变化。最后，用统计学的方法分析处理相关数据。结果：利用携带shRNA的慢病毒下调肝癌细胞Hep3B、Huh7和PLC/PRF/5的SIRT1的表达，通过增殖实验、transwell实验、克隆形成实验和成球培养等实验方法来检测相关功能的变化，结果表明，与对照细胞相比，下调SIRT1表达后，肝癌细胞Hep3B、Huh7和PLC/PRF/5的增殖受到抑制；肝癌细胞Hep3B和Huh7细胞系的迁移能力明显减弱，而在PLC/PRF/5细胞中没有明显影响；肝癌细胞Hep3B、Huh7和PLC/PRF/5所成的克隆更小而且克隆形成率也明显下降；成球培养成的细胞球比对照细胞小，而且成球率下降也极显著。结论：上述结果显示，下调肝癌细胞Hep3B、Huh7和PLC/PRF/5的SIRT1表达能有效地抑制细胞的增殖和迁移能力，对细胞的克隆形成和自我更新能力的抑制极显著，对维持自我更新能力显著抑制。