高效液相色谱(HPLC)是一种重要的分析和分离技术，在分析化学中发挥着极为重要的作用，除了研究固定相和流动相之外，联用技术也是发展HPLC技术的重要内容。质谱的通用性，高灵敏度，分子量和结构信息的提供，以及通过柱后衍生仪将无生色团的物质接上紫外或荧光吸收基团，使得HPLC的应用范围更广，特别是无紫外光吸收和无荧光反应体系的检测更具重要意义。　　 本文建立了LC-MS联用技术测定嘉陵江水和虾中的三类抗生素含量和正交优化法合成两个脯氨酸有机催化剂并对其结构进行鉴定的方法，并比较研究了邻苯二甲醛(OPA)柱前和柱后衍生色谱法测定阿米卡星的优缺点。论文由综述和研究报告两个部分组成。综述部分简述了高效液相色谱的特点，联用技术的发展，在各领域的应用现状和发展趋势。研究报告部分建立了LC-MS联用技术测定水环境和生物体内抗生素的残留以及对有机合成的产物检测和机理解释，并且建立了OPA柱前和柱后衍生色谱法测定氨基糖苷类药物的比较研究。包括：LC-MS联用技术同时测定嘉陵江水和虾中的三种抗生素的方法，高效液相色谱串联质谱正交优化法合成两个脯氨酸有机催化剂并对其结构进行鉴定，和OPA柱前和柱后衍生色谱法测定阿米卡星的比较研究。　　 1.LC-MS联用同时测定嘉陵江水和虾中的三类抗生素　　 应用固相萃取和超高效液相色谱-质谱联用技术，建立了同时测定嘉陵江水和虾中的三类抗生素。样品经固相萃取柱富集、净化后进入高效液相色谱-质谱环境进行分离和检测。采用Gemini-C18色谱柱，流动相为水和乙腈以0.2 mL/min的流速，进行梯度洗脱。结果发现，克林霉素(CLD)在25～1250 pg·L-1，林可霉素(LIC)在10～625 pg·L-1，氧氟沙(OF)在10～625 pg·L-1，环丙沙星(CIP)在25～625 pg·L-1，土霉素(OTC)在25～2500 pg·L-1，四环素(TC)在pg·L-1和金霉素(CTC)在25～2500 pg·L-1都有良好的线性关系。线性回归系数均大于0.999。样品加标回收率在94.0％和108.0％之间，相对标准偏差(R.S.D.)均低于5.0％。方法简便，快速，灵敏，线性关系好，重复性高，可用于嘉陵江水环境的三种抗生素的测定。　　 2.高效液相色谱串联质谱法优化合成两个脯氨酸有机催化剂并对其结构进行鉴定　　 一种简单、快速的正交反应优化手段以高效液相色谱-串联质谱的形式建立。两个脯氨酸有机催化剂即在优化的条件下进行了合成。该方法不仅找到了最佳的反应条件，还能确定各因素之间对反应作用的强弱，同时还能在不中止反应的情况下，依靠高效液相色谱的高效分离对原料和产物进行分离；通过质谱的强定性能力监控反应和对无生色基团的产物进行鉴定，从而对反应机理进行解释。高效液相色谱不再因常用检测器对检测底物的结构要求而受限，节约了时间，也拓展了HPLC-MS/MS的应用。　　 3.OPA柱前和柱后衍生色谱法测定阿米卡星的比较研究　　 采用邻苯二甲醛(OPA)和巯基醇建立的灵敏度高，选择性好的柱前和柱后衍生测定在药物制剂和人血清的阿米卡星(AMI)，新霉素为内标物。荧光检测，340 nm进行激发，发射波长为465 nm。测定比较发现柱前衍生有更宽的线性范围0.1～50μg·mL-1(r≥0.999)，峰形也更好，但检测限(LOD)为12.0 ng·mL-1，反应的副作用多，实验更耗时；而柱后衍生测定的线性范围的0.05～20μg·mL-1，检测限为7.7 ng·mL-1，副反应少，省时，但峰形更宽，衍生条件更为复杂。柱前和柱后回收率分别为91.7％和107.3％，相对标准偏差(R.S.D.)值低于6.8％。这两种方法均可用于检测药物制剂及其生物基质中的氨基糖甙类抗生素阿米卡星。柱前和柱后衍生的比较结果显示，柱前衍生对于测定药物制剂更好而柱后衍生更适合于有生物基质的药物测定。