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目的：研究磁场结合阿霉素对贴壁生长的肿瘤细胞协同杀伤的细胞学机制，并进一步探究磁场造成细胞周期阻滞的可能原因。
方法：
1．采用MTT法检测磁场、阿霉素及磁场+阿霉素对贴壁生长的肿瘤细胞(SMMC-7721、HepG-2和SW480)增殖的影响。
2．通过光学显微镜、原子力显微镜、单细胞凝胶电泳、流式细胞仪等手段，检测磁场结合阿霉素对肿瘤细胞的协同杀伤效应。
3．采用MTT检测、细胞同步化、免疫荧光法及检测活性氧自由基(ROS)等方法进一步研究磁场及磁场联合阿霉素杀伤肿瘤细胞的机制。
结果：
1．(1)SMMC-7721细胞以1×10<5> cells/mL的细胞密度接种，曝磁6h，即可对细胞生长造成显著的抑制效应(p<0.05)；细胞以5×10<4> cells/mL的密度接种，曝磁9h稳恒磁场对其生长有极显著的抑制作用(p<0.01)。(2)HepG-2细胞以1×10<5>cells/mL和5×10<4> cells/mL的细胞密度接种，磁场处理24h，即对细胞增殖有明显的抑制作用(p<0.01)。(3)SW480细胞分别以1×10<5> cells/mL和5×10<4> cells/mL的密度接种，MTT检测发现：磁场分别处理36h和24h即对SW480细胞增殖造成明显的抑制效应(p<0.01)。
2．(1)SMMC-7721细胞以1×10<5> cells/mL的细胞密度接种，40ng/mLN霉素单独处理细胞6h可引起细胞生长抑制(p<0.05)；5ng/mL阿霉素与磁场联合作用5h即对细胞有杀伤作用(p<0.05)；细胞接种密度为5×10<4> cells/mL时，5ng/mL阿霉素单独处理细胞9h可对细胞生长造成明显的抑制效应(p<0.05)，而联合磁场时，作用时间仅用8d,时、阿霉素浓度仅需要0.2ng/mL即对细胞有杀伤作用(p<0.05)。(2)HepG-2细胞以1×10<5> cells/mL的细胞密度接种，10ng/mL阿霉素单独处理细胞12h即可引起细胞生长抑制(p<0.05)；联合磁场作用时，细胞生长抑制所需的阿霉素浓度降低到1ng/mL。当细胞以5×10<4> cells/mL的密度接种时，100ng/mL阿霉素单独处理细胞12h可对细胞生长造成明显的抑制效p<0.05，结合磁场共同作用时，阿霉素的浓度只需10ng/mL (p<0.05)。(3)SW480细胞以1×10<5> cells/mL的细胞密度接种，50ng/mL阿霉素单独处理细胞12h即可引起细胞生长抑制 (p<0.05)，阿霉素联合磁场作用时的浓度可下降到22.5ng/mL(p<0.05)；细胞低密度(5×10<4> cells/mL)生长时，30ng/mL阿霉素单独处理细胞12h可抑制细胞生长p<0.05，联合磁场作用时，阿霉素的浓度可减少到5ng/mL(p<0.05)。
3．(1)HE染色结果及倒置显微镜观察处理前后细胞的形态变化，发现与对照组细胞相比，曝磁组细胞略微鼓起；阿霉素组细胞隆起、回缩，贴壁性能降低；磁场+阿霉素组细胞回缩变圆，细胞边缘粗糙，少量细胞漂浮，视野中可见细胞碎片。(2)原子力显微镜观察细胞表面的微细结构，发现曝磁组细胞表面较为粗糙，表面有向外的隆起，且有数量增多的凹陷存在；细胞经阿霉素处理后，表面破损并出现孔洞结构；当二者联合作用时，细胞表面出现较大较深的不规则孔洞，且孔洞周边隆起，表面破坏严重。(3)磁场、阿霉素以及磁场联合阿霉素处理肿瘤细胞后，细胞周期分布均发生改变；不同组织来源、不同分化程度的肿瘤细胞之间存在差异。SW480和SMMC-7721细胞曝磁后，G2/M期细胞比例增多；而HepG-2细胞经磁场处理后，G1期细胞比例增加。磁场结合阿霉素处理，SMMC-7721细胞G2/M期细胞比例增多，而SW480与HepG-2细胞G1期细胞比例升高。(4)单细胞凝胶电泳检测显示，阿霉素处理可引起细胞DNA损伤，曝磁组细胞未检测到DNA损伤，然而当磁场联合阿霉素作用后，检测到细胞DNA发生严重损伤，与阿霉素组相比存在极显著差异(p<0.01)。
4．(1)当SMMC-7721、HepG-2以及SW480三种肿瘤细胞以不同密度接种，磁场结合不同浓度阿霉素处理不同时间，ROS检测得到一致实验结果：单纯磁场、单纯阿霉素及磁场结合阿霉素作用细胞后，与对照组相比，ROS均有明显增加(p<0.01)。(2)不同周期时相K562细胞，对磁场或/和阿霉素处理的敏感性存在差异，其中对磁场的敏感性排序如下：S期>G2期、M期；对阿霉素的敏感性次序稍有变化：S期>G2期>M期。(3)不同周期时相cyclinB1在细胞中处于不同位置，G1期、S期时位于细胞质；G2期时开始由细胞质转入细胞核；G2/M、M期早期时位于细胞核。经过不同时间曝磁处理后，对照组细胞中cyclin B1定位于细胞质，细胞群体中S期细胞比例较大；实验组中大多数细胞cyclin B1已经转定位于细胞核， G2/M期细胞在整个细胞群体中比例增多。
结论：通过对细胞形态、细胞周期分布及细胞DNA损伤的检测发现：稳恒磁场与阿霉素对肿瘤细胞存在协同杀伤效应。磁场造成细胞周期捕获可能是由于细胞周期蛋白B(cyelin B)在磁场作用下，定位发生变化所致；同时检测到各周期时相对磁场的敏感性存在差异，从而导致了磁场药物联用后某一特定时相细胞数量的增加或下降。