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天然免疫信号通路通过模式识别受体识别病原相关分子模式抵抗病原微生物入侵。当DNA病毒入侵时，DNA识别受体识别病毒双链DNA并介导天然免疫反应，其中NF-κB信号通路发挥重要作用。泛素化是一种广泛存在的蛋白质翻译后修饰，参与很多重要生命过程，如信号传导、蛋白质降解及免疫应答反应等。多种病毒编码的去泛素化酶（deubiquitinase，DUB）可通过调控宿主蛋白的泛素化来干扰宿主抗病毒应答。人类I型单纯疱疹病毒（herpes simplex virus type1，HSV-1）是一种线性双链DNA病毒，在人群中极为常见，可导致口唇疱疹、角膜结膜炎、脑炎等疾病。HSV-1编码皮层蛋白UL36，其蛋白氨基端的去泛素化酶结构域，称为UL36USP，目前UL36USP干扰宿主抗病毒天然免疫信号通路的机制尚不清楚。 本文通过双荧光素酶报告基因检测系统结合多种分子生物学、免疫学实验技术及利用细菌人工染色体技术构建的突变病毒，研究HSV-1 UL36USP干扰宿主DNA受体信号通路的分子机制，以阐明 UL36USP在 HSV-1致病机制中的作用，为防治疱疹病毒寻找新的药物靶点及研发新型药物和疫苗奠定理论基础。细胞质DNA受体cGAS（cyclic GMP-AMP synthase）识别外源DNA，利用STING（stimulator of interferon gene）介导的下游信号通路能显著抑制HSV-1的复制。本研究发现，外源表达的UL36USP可以抑制ISD（interferon stimulatory DNA）激活的干扰素β（interferon-β，IFN-β）的转录。双荧光素酶报告基因实验显示，UL36USP可以抑制cGAS和STING激活的IFN-β和NF-κB的启动子活性。同时，UL36USP可以抑制超表达STING、TBK1（TANK-binding kinase1）、IKKα（IκB kinaseα）、IKKβ激活的 NF-κB启动子活性，但不能抑制 p65激活的 NF-κB启动子活性，这说明UL36USP对NF-κB通路的抑制水平在IKK和p65之间。进一步研究发现，UL36USP可以去泛素化IκBα抑制IκBα降解，从而抑制NF-κB激活。接下来我们用缺失了去泛素化酶活性的重组病毒（C40A HSV-1）来验证UL36USP的作用，发现C40A HSV-1不能去泛素化IκBα，且感染C40A HSV-1的细胞，其IFN-β产生量明显高于野生型（WT）HSV-1。这些结果表明，在DNA受体信号通路中，UL36USP利用其去泛素化酶结构域，通过去泛素化IκBα抑制NF-κB的激活，从而逃逸宿主的抗病毒天然免疫反应。