高糖环境下HGF对血管内皮细胞增殖及c-met mRNA表达的影响

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ren_lian
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目的:研究高糖对人血管内皮细胞(EC304)增殖及HGFmRNA表达的影响及高糖环境下HGF对人血管内皮细胞增殖及c-metmRNA表达的影响,从而进一步探讨糖尿病心血管并发症的发病机理和HGF对糖尿病心血管并发症的治疗作用。 方法:体外培养EC304。细胞分别培养于不同的条件培养基中,采用MTT方法检测不同浓度的高糖在不同的作用时间对EC304增殖的影响及高糖环境下HGF在不同的作用时间对EC304增殖的影响;逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)方法分析高糖在不同的作用时间对HGFmRNA表达水平的影响,高糖及高糖环境下HGF在不同的作用时间对c-metmRNA表达水平的影响。 结果:EC304在高糖的诱导作用下,6h时各组细胞增殖能力无明显差别,但随着作用时间的延长,作用12h时,细胞增殖较对照组明显增强,且随着高糖浓度的增加,细胞增殖明显增强,细胞增殖致24h达高峰,48h细胞增殖被抑制,细胞数量较24h明显减少,出现抑制细胞增殖的现象,96h时细胞的数量进一步减少,且呈浓度依赖性。HGF组与高糖组相比,6h和12h无明显差别,作用24h、48h、96h时HGF组细胞增殖旺盛。作用6h,高糖组HGFmRNA的表达与对照组无明显差别,作用12h,高糖组HGFmRNA的表达较对照组升高,作用24h,HGFmRNA的表达开始降低,随着作用时间的延长,HGFmRNA的表达逐渐降低,即高糖降低HGFmRNA的表达。作用6h各组c-metmRNA的表达之间无显著差别,作用12h,高糖组和HGF组c-metmRNA的表达开始升高,较对照组明显升高,一直持续到24h达高峰,而在48h和96h时高糖组较对照组和HGF组c-metmRNA表达明显减少;HGF组同高糖组相比可明显增加c-metmRNA的表达。 结论:高糖早期(6h)对血管内皮细胞增殖、c-met和HGFmRNA的表达无明显影响,高糖中期(12h、24h)促进血管内皮细胞增殖、上调c-metmRNA的表达,HGFmRNA的表达12h达高峰,晚期(48h、96h)诱导内皮细胞凋亡、下调c-met和HGFmRNA的表达;高糖环境下HGF可上调c-metmRNA的表达,促进细胞增殖,减少高糖对细胞的死亡作用;从而维持血管内皮细胞功能,抑制动脉粥样硬化。
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