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研究目的:应用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)蛋白组学及MiSeq测序技术分别探讨姜黄素及利拉鲁肽改善大鼠非酒精性脂肪肝(NAFLD)分子机制。研究方法:(1)将24只SD大鼠随机分为普食组(8只),高脂组(16只),分别饲以普通饲料和高脂饲料,12周后高脂组随机分为高脂组(8只)与姜黄素组(8只),高脂组继续高脂饲料,姜黄素组高脂饲料+姜黄素灌胃(200 mg/kg/日)处理。16周后所有大鼠麻醉后断颈法处死,收集肝脏,血清标本,油红O染色法检测肝脏组织病理,酶联免疫吸附实验(ELISA)法测肝脏甘油三酯含量、血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及雌二醇水平。iTRAQ标记蛋白组学测肝脏组织蛋白表达情况,实时定量多聚酶链反应(RT-qPCR)测β-actin、17β-羟类固醇脱氢酶(17β-HSD2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)及过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)mRNA表达水平。(2)将24只SD大鼠随机分为普食组(8只),高脂组(16只),分别饲以普通饲料和高脂饲料,12周后高脂组随机分为高脂组(8只)与利拉鲁肽组(8只),高脂组继续高脂饲料,利拉鲁肽组高脂饲料+利拉鲁肽皮下注射(0.4mg/kg/日)处理。16周后所有大鼠麻醉后断颈法处死,收集肝脏、小肠、血清及粪便标本,油红O染色法检测肝脏组织病理,ELISA法测肝脏甘油三酯含量及血清ALT、AST、肿瘤坏死因子α(TNFα)、脂多糖(LPS)、二胺氧化酶(DAO)水平,电镜观察大鼠肠道病理,MiSeq测序检测肠道菌群变化。实验结果:(1)姜黄素明显减少高脂饮食促发的肝脏脂滴沉积,减少肝脏甘油三酯含量(P<0.05),降低血清ALT水平(P<0.05),升高血清雌二醇水平(P<0.05)。肝组织iTRAQ蛋白组学结果显示谷胱甘肽-S-转移酶α2、Ras相关蛋白Rab13和视黄醇脱氢酶2在普食组和姜黄素组较高脂组表达明显升高,蛋白磷酸酶1G和17β-HSD2在普食组和姜黄素组较高脂组表达明显降低;RT-qPCR显示普食组和姜黄素组17β-HSD2 mRNA表达量较高脂组明显降低(P<0.05),PCG-1α和PPARαmRNA表达量在普食组和姜黄素组较高脂组明显升高(P<0.05)。(2)利拉鲁肽显著减少高脂饮食诱发的肝脏脂滴沉积,降低肝脏甘油三酯含量(P<0.05),降低血清ALT、TNFα、LPS、DAO水平(P<0.05)。α多样性分析显示,与普食组相比,高脂组和利拉鲁肽组肠道菌群丰富度均显著下降(P<0.05),物种多样性改变不明显。β多样性分析显示,3组肠道菌群结构间存在明显相互差异。100种OTUs在3组间存在明显差异,其中78种OTUs与7项代谢异常及慢性炎症指标中至少一项存在显著相关性,其中23种与7项指标呈正相关的OTUs在普食组和利拉鲁肽组均明显低于高脂组(P<0.05),5种与7项指标呈负相关的OTUs在普食组和利拉鲁肽组均明显高于高脂组(P<0.05)。研究结论:(1)姜黄素可能通过抑制肝脏17β-HSD2,增加血清雌二醇水平改善高脂促发的大鼠NAFLD。(2)利拉鲁肽可能通过调节肠道菌群,降低体重,改善体内慢性炎症改善高脂诱发的大鼠NAFLD。