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[目的]采用多种口腔溃疡动物模型,观察黄芩苷锌(Zinc baicalin)对动物口腔溃疡的影响,并初步探讨黄芩苷锌对口腔溃疡的作用机理。
[方法]利用冰醋酸烧灼法、粘膜下注射甲基紫精(MV)法和化疗法分别制备大鼠口腔溃疡模型。造模成功后,将(0.3、0.6、1.2mg/c㎡)三个剂量的zinc baicalin药膜贴于患处,正常对照组不给予任何措施,模型组给予空白膜,以复方庆大霉素贴膜做阳性对照,观察Zinc baicalin对动物口腔溃疡的影响并探讨其作用机理。
观测指标:①观测动物口腔粘膜变化,测定无水肿粘膜溃疡面积。并用数码相机(700万像素)对溃疡变化进行拍照记录。此外,记录动物口腔溃疡的愈合时间,计算溃疡愈合的平均速度。②每天观测各组动物的一般状态并计算饲料和水的摄入量。③取病变粘膜组织做病理切片,镜下观察溃疡变化情况。④在实验不同时段各组随机取几只动物取病变粘膜制备组织匀浆,测定血清和病变粘膜中SOD活力和MDA的含量。⑤检测正常大鼠肝匀浆中SOD、GSH—PX、CAT的活力。⑥利用免疫组化方法测定病变粘膜中PCNA和EGFR的表达。
实验所得数据均用SPSS数学统计软件,采用方差分析、t检验和秩和检验进行统计学分析。
[结果]
①成功的复制了大鼠口腔溃疡模型。
②对化疗法致大鼠口腔溃疡的影响结果:给药后2、3天黄芩苷锌高剂量组溃疡面积明显缩小,与模型组比较,与低剂量组比较。给药后黄芩苷锌高剂量组和庆大霉素组摄水量和摄食量明显升高,与模型组比较。
③对粘膜下注射MV法致大鼠口腔溃疡的结果:给药后2、3、4、5天黄芩苷锌组溃疡面积明显缩小,与模型组比较。给药后4、6天黄芩苷锌组动物血中SOD活力明显高于模型组;组织中SOD活力在给药后2、4天高于模型组。给药后2、4天黄芩苷锌组血、组织中MDA含量都有所下降,与模型组比较。
④黄芩苷锌对正常大鼠肝匀浆中SOD和GSH—PX作用结果:黄芩苷锌给药组可提高肝匀浆中SOD和GSH—PX的活力,与其他各组比较。
⑤对冰醋酸法致大鼠口腔溃疡的作用结果:发现黄芩苷锌组的溃疡面积明显缩小,与同时间点的模型组比较;与阳性组比较。黄芩苷锌高剂量组的溃疡平均愈合速度大于模型组。显微镜观察显示:黄芩苷锌三个剂量组病变程度明显轻于模型组。免疫组化观察显示:给药后4天黄芩苷锌高剂量组PCNA阳性表达细胞数明显高于空白组和模型组;黄芩苷锌低、中剂量组与模型组比较。各给药组EGFR阳性表达细胞数显著高于模型组;其中以黄芩苷锌高剂量组最为明显,并高于其他各给药组。
[结论]经实验证明黄芩苷锌对上述三种方法所致大鼠口腔溃疡都有治疗作用,可降低溃疡周围炎症,缩小溃疡面积,降低血液和组织中MDA的含量,提高局部组织GSH—PX和SOD的活力,具有较好的抗氧化能力,黄芩苷锌可以促进口腔粘膜上皮中PCNA和EGFR的表达,明显促进实验性口腔溃疡的愈合,具有广泛的应用前景。