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背景:刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种机会性有核细胞内寄生的原虫,在人类和众多动物中传播人畜共患的弓形虫病。弓形虫毒力分型有三种,I型、II型和III型,在欧洲,北美和非洲占主导地位。而我国的弓形虫优势基因型是Chinese 1基因型,其中最具代表性的是强毒株Wh3型和弱毒株Wh6型,更有趣的是Wh3和Wh6基因型同源性高达90%,两种虫株均具有ROP16I/III和GRA15II多态性。但是两者的毒力差异比较大,而且两种虫株都能巨噬细胞的极化,Wh3虫株诱导巨噬细胞M2/Th2方向极化。而Wh6虫株诱导巨噬细胞向M1/Th1方向极化。细胞免疫在抗弓形虫感染中起主导作用,也是对弓形虫感染最敏感的细胞,并为弓形虫的增殖提供了一个环境,这也是急性感染的重要途径。巨噬细胞可以产生各种生物活性的细胞因子;它可以对T细胞呈递抗原诱导适应性免疫应答;通过有氧和非氧机制控制和杀死寄生在细胞内的虫体。巨噬细胞对细胞内寄生虫发挥杀伤作用或者抑制虫体携带以及传播,以及宿主对弓形虫的易感性,主要取决于经典途径活化的巨噬细胞(M1)和旁路途径激活的巨噬细胞(M2)的功能。巨噬细胞M1和M2的极化方向会影响弓形虫感染宿主的急性感染的结局。弓形虫至今尚无有效的防治药物,安全有效的疫苗是防治弓形虫病的策略之一,理想活虫疫苗不仅能够刺激机体产生有效保护性,而且不具备增殖和播散能力。弓形虫为食源性寄生虫病,多数动物因食入包囊污染的食物而感染。鉴于中国优势基因型的两个虫株交叉感染保护性免疫作用的研究未见报道,本课题利用Wh3和Wh6虫株,建立弓形虫免疫感染的BALB/c小鼠模型,探讨弓形虫带虫免疫作用,为减毒活疫苗虫株筛选及免疫机制研究提供理论基础。目的:探讨我国流行的优势基因型Chinese 1弱毒Wh6株感染抗致死性强毒Wh3株攻击感染的保护力,探讨其潜在的制备减毒活疫苗的价值。方法:将30只BALB/c雌性小鼠随机分为3组(I,II,III组),每组10只。取弱毒株弓形虫保种小鼠脑组织,分离包囊,计数。I组小鼠灌胃包囊25-35个;II组给与PBS对照;III组正常小鼠不予任何干预。35天后,I组感染小鼠脑组织压片镜检,查见典型弓形虫包囊,表明慢性弓形虫感染BALB/c小鼠模型建立成功。取Wh3株速殖子(3000个),腹腔感染I组和II组小鼠,观察小鼠存活及腹腔虫荷;同时剖杀小鼠,收集脾细胞培养上清,采用流式细胞术、荧光定量PCR、酶联免疫吸附试验等检测脾细胞中的Th1、Th2细胞因子水平。结果:II组对照鼠在感染Wh3株弓形虫速殖子后一周内全部死亡;而I组小鼠截止实验结束全部存活,(P<0.01)。II组鼠脾细胞培养上清Th1和Th2细胞因子IFN-γ、IL-10和IL-12水平相比I组显著升高(p<0.001)。结论:用弱毒株Wh6包囊攻击感染BALB/c鼠,可诱导强力的抵抗Wh3强毒株致死性感染的免疫保护力。小鼠100%的存活率使我们有理由相信Chinese 1基因型Wh6株具有候选减毒活虫疫苗研究的潜在价值。