高脂喂养大鼠肝脏、骨骼肌、脂肪及胰岛组织中胰岛素受体和胰岛素受体底物-1及其磷酸化水平的早期改变

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研究目的:观察高脂饲养大鼠在胰岛素抵抗形成的前期(一共六个时段)肝脏、骨骼肌、脂肪及胰岛内胰岛素受体(IRc)及其底物-1(IRS-1)的表达量及其酪氨酸磷酸化水平的变化,探讨胰岛自身的胰岛素抵抗与各外周组织胰岛素抵抗的差异及时相关系。 实验对象及方法:60只wistar大鼠,随机分为高脂组和正常饲料对照组,每组30只,同期喂养,分为6个时段,分别为喂养1、2、4、6、8、12周六个亚组,每亚组5只。各亚组在其喂养期满后,立即于禁食14h,麻醉后取尾静脉血测血糖,开腹后门静脉采血分别注入抗凝及不抗凝管中,经离心后取血清和血浆,检测包括胰岛素、甘油三酯、胆固醇、FFA等指标,然后注入胰岛素后分别于30、90、100、120秒取大鼠的肝脏、骨骼肌、脂肪组织和胰腺组织,并于液氮保存,待标本收集齐后,采用免疫沉淀和免疫印迹方法测得各组织IRc、IRS-I的量及其酪氨酸磷酸化水平,并通过图像处理,分析灰度得出数值。所有标本结果以均数±标准差表示。每一亚组均与同期对照组比较作统计分析。 结果:1、在IRc环节,高脂鼠肝脏和胰岛的IRc均在第1周末即明显少于正常鼠;而受体酪氨酸磷酸化水平,肝脏在第1周末明显低于正常对照,胰腺在第2周末才出现低于正常。高脂鼠骨骼肌和脂肪组织IRc数量变化
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