超声引导下低能级微波消融诱导KMH-2甲状腺癌实体瘤凋亡的实验研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:lcsj652
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[目的]①经皮瘤细胞注射法建立适合微波消融的鼠KMH-2甲状腺癌模型。②通过多种检测方法评价通过对比不同功率设置的微波消融对裸鼠KMH-2甲状腺癌的消融效果,探寻引起肿瘤细胞大量凋亡的最低的参数,并评价对其对KMH-2甲状腺癌的短期疗效进行评价。[方法]将裸小鼠随机分为4组,每组10只,在超声引导下分别注射不同数量(5×105个,1×106个,2×106个,4X106个)的KMH-2甲状腺癌细胞,选择成瘤率理想的细胞数再次造模,待瘤体长径达到0.8-1.Ocm时将模型小鼠随机分为7组(n=6),对瘤体进行微波消融进行处理,前期通过预实验对小鼠的消融温度和消融温度做筛选,得出了消融温度45℃,消融时间为2min的消融条件,功率设置为A组为对照组即0W(6只)、B组为5W(6只)C组为10W(6只)、D组为15W(6只)、E组为20W(6只)、F组为25W(6只)、G组30W(6只)。运用高频彩色多普勒超声二维成像、彩色成像及弹性成像观察治疗前后的影像学变化,每组随机选取3只裸鼠进行处死,将治疗后的肿瘤模型进行取材固定后对其进行HE染色及TUNEL染色法检测凋亡指数,将凋亡指数与弹性成像结果进行分析。治疗后 A 组(OW)、B 组(5W)、C 组(10W)、D 组(15W)、E 组(20W)、F(25W)、G(30W)对照组动物观察1天及30天做二维超声检查及弹性成像检查,解剖瘤体进行病理检查,通过HE染色法及TUNEL染色法检测各组肿瘤凋亡坏死情况,对各组动物1个月的存活率、各组动物治疗后是否有肿瘤复发或转移进行观察。数据分析:采用SPSS 19.0统计软件对实验结果数据进行统计分析。各项实验均独立重复3次,计量资料以x±s表示,2独立样本均数间的比较采用Student t检验;多组间均数的比较采用方差分析,组内两两比较采用LSD-t检验。p<0.05为差异有统计学意义[结果]1.5×105组,1×106组,2×106组,4×106组,随着细胞浓度增加成瘤率增加,其中4X106个细胞组成瘤细胞生长虽迅速,但瘤体不规则、易分叶、松软,不适合消融操作,故本实验采用2X106为接种浓度。2.A至F组随着功率增加,消融后对组织进行弹性成像及测量杨氏模量值越高,硬度越大,A-D组细胞功率随着增大,凋亡指数增高,各组之间差异具有统计学意义(p<0.05),当消融功率上升至15W后弹性成像杨氏模量值达到63.2±6.2,细胞凋亡指数达到平台期0.61±0.16,E组杨氏模量为87.6±8.6凋亡指数为0.60±0.15,F组杨氏模量为149.6±22.1,凋亡指数为0.61±0.17,D、E、F功率越高硬度越大,三组凋亡指数之间差异无统计学意义(p>0.05),G组凋亡指数为0.59±0.12,杨氏模量为149.4±20.1。[结论]本研究为评价低能级微波对甲状腺癌消融效果进行评价,在使用课题前期筛选出的最佳时间参数、温度设置参数后我们进行消融功率的筛选,应用弹性成像方法检测杨氏模量值、Tunel法各组甲状腺肿瘤凋亡情况,评估低功率治疗甲状腺癌的效果,找到最佳参数15W。证明了:对裸小鼠KMH-2细胞皮下移植癌性甲状腺癌行低功率微波热消融可导致靶区硬度增加,在杨氏模量达到63左右时,消融的肿瘤组织发生了大量凋亡。本研究仅仅是一个实验性的研究,为临床上甲状腺癌的治疗手段提供了一个初步思路,尚待有大样本的进一步研究制定统一的治疗规范。为低能级消融甲状腺癌可成为一种手术治疗的另一选择设想得到试验验证,为临床对甲状腺癌的治疗提供了一种高效、安全、便捷的低创伤性治疗提供了思路和方法。
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