植物乳酸杆菌P101缓解铅暴露诱导心肌损伤的机制研究

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目的:研究植物乳杆菌P101对铅暴露引起小鼠心肌损伤的缓解作用,并探究其作用机制。方法:将6周龄的C57BL/6雄性小鼠随机分为三组:正常饮食组(ND)、ND+铅暴露(Pb)组和ND+Pb+P101组。其中,ND+Pb组和ND+Pb+P101组的小鼠在正常饮食基础上被灌胃含Pb的纯净水,ND+Pb+P101组的小鼠同时被灌胃200μL植物乳杆菌溶液(2×10~8CFU的P101)。实验持续8周,断颈处死小鼠后取心脏组织。通过检测血清标志物(ALAD、Tn-T、AST、ALT、TG和CHO),心肌促炎细胞因子(p-NF-κB、TNF-α、IL-1β和PAI-1)、心肌凋亡标志物(casepase-3)、心肌损伤标志物(p21和BNP)、TH1/TH2平衡相关蛋白(T-bet/GATA-3),以及心脏纤维化相关指标(天狼星红染色及胶原1A1表达)来评估心肌损伤。结果:1.与ND组相比,ND+Pb组的ALAD显著降低(P<0.001),Tn-T、AST和ALT值显著升高(P<0.05)。与ND+Pb组相比,ND+Pb+P101组的ALAD值明显升高(P<0.01),Tn-T、AST和ALT值明显降低(P<0.05)。在所有组别中,TG和CHO的变化差异没有统计学意义(P>0.05)。2.应用Western blot技术检测各组心肌组织中p-NF-κB、TNF-α、IL-1β和PAI-1蛋白的表达水平。结果显示,与ND组相比,ND+Pb组中p-NF-κB、TNF-α、IL-1β和PAI-1的蛋白表达升高(P<0.001);与ND+Pb组对比,ND+Pb+P101组中p-NF-κB、TNF-α、IL-1β和PAI-1的蛋白表达减少(P<0.01)。3.与ND组对比,ND+Pb组心肌组织中的caspase-3和p21表达增加(P<0.001)。然而,与ND+Pb组对比,ND+Pb+P101组中caspase-3和p21的表达下降(P<0.01)。4.与ND组对比,ND+Pb组心肌组织中的BNP表达增加(P<0.001)。然而,与ND+Pb组对比,ND+Pb+P101组中BNP的表达下降(P<0.01)5.相对于ND组,ND+Pb组心肌组织中的GATA-3表达上升(P<0.001),而T-bet表达减少(P<0.01)。植物乳杆菌P101的干预后,与ND+Pb组相比,ND+Pb+P101组中GATA-3表达降低(P<0.001),而T-bet表达升高(P<0.01)。6.IL-1β免疫组化分析显示:与ND组相比,ND+Pb组中IL-1β的表达升高(P<0.05);然而ND+Pb+P101组中IL-1β的表达较ND+Pb组中降低(P<0.05)。7.Collagen1A1蛋白免疫印迹结果显示:与ND组相比,ND+Pb组中的Collagen1A1的蛋白表达升高(P<0.01),与ND+Pb组对比,ND+Pb+P101组中Collagen1A1的蛋白表达减少(P<0.05)。8.Sirius Red染色分析:在ND+Pb组中,胶原纤维含量高于ND组(P<0.01)。然而,在ND+Pb+P101组中,胶原纤维含量相较于ND+Pb组降低(P<0.05)。与此同时,胶原1A1蛋白的免疫组化表达结果显示:在ND+Pb组中,胶原1A1的表达显著高于ND组(P<0.01),在ND+Pb+P101组中,胶原1A1的表达比ND+Pb组降低(P<0.05)。结论:1.铅暴露可诱导小鼠心肌损伤。2.植物乳酸杆菌P101缓解铅暴露诱导的心肌损伤可能与TH1/TH2平衡有关。
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