二烯丙基二硫对人白血病HL-60细胞株增殖的影响及其机制探讨

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目的探讨二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人白血病HL-60细胞株增殖的影响及survivin蛋白表达的变化和细胞周期的改变之间的关系,从而探讨DADS的抗白血病机制。方法采用MTT法观察DADS对体外培养的HL-60细胞增殖的影响;应用SP-免疫细胞化学法检测药物作用前后白血病HL-60细胞内survivin蛋白的含量;同时用流式细胞仪(FCM)检测细胞周期变化。结果DADS对HL-60细胞具有明显的生长抑制效应。其对HL-60细胞的生长抑制率与药物浓度、时间有明显依赖关系(r>0.9,P<0.01)。0.625mg/LDADS干预HL-60细胞24小时,细胞生长抑制率为8.94%,随着浓度增加,时间延长,20.0mg/L的DADS作用HL-60细胞72小时后,细胞抑制率升高至70.66%。SP免疫组化显示空白对照组及DMSO溶媒对照组均有survivin蛋白的高表达,其染色强度指数(SII)分别为1125及1126,两者无显著性差异(P>0.05)。5、10、20mg/L的DADS作用于HL-60细胞24、48及72小时能呈时间、浓度依赖性下调survivin蛋白的表达(r>0.9,P<0.01),20mg/L的DADS作用于HL-60细胞72小时,SII为119,survivin蛋白表达抑制最为明显。三个DADS浓度组间差异显著(P<0.01),与空白对照组比较也有显著性差异(P<0.01)。流式细胞仪检测结果提示,伴随着survivin蛋白的下调,DADS可呈浓度、时间依赖性阻滞细胞于G2/M期(r>0.9,P<0.01)。20mg/L的DADS作用于HL-60细胞72小时G2/M期细胞比例达最高峰,为66.56%。结论DADS能明显抑制HL-60细胞的增殖;DADS下调survivin蛋白,并使HL-60细胞阻滞于G2/M期。
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