目的:1.建立血液中毒品类（甲基苯丙胺、氯胺酮、吗啡）、苯二氮（?）类（舒乐安定、咪达唑仑、安定、氯硝安定）和巴比妥类（苯巴比妥）等三大类共8种药（毒）物的LC-MS/MS检测方法;2.研究8种药（毒）物的LC-MS/MS定性结果中保留时间和离子比率的最大允许偏差,并与国内外相关指导性文件进行比对;3.通过对实际案例中定性指标的研究,验证判定指标结果的可靠性。方法:1.优化色谱和质谱条件,血液样本采用液液提取的方法,通过空白添加实验,分析不同提取溶剂和pH对药物回收率的影响,建立提取和检测方法。2.配制不同浓度的血液添加样品和相应浓度的标准品溶液,按照一定顺序进样,统计分析数据,探讨定性参数如保留时间和离子比率的最大允许偏差。3.收集实际案例,探讨实际案例中定性参数的偏差范围。4.统计学方法和其他软件:采用SPSS-20.0软件分析数据,Graphpad Prism6绘图。结果:1.LC-MS/MS可以对8种药（毒）物进行检测,甲基苯丙胺、氯胺酮、吗啡、舒乐安定、咪达唑仑、安定、氯硝安定和苯巴比妥8种药（毒）物在一定浓度范围内线性关系良好,检测限分别为3ng/m L、1ng/m L、20ng/mL、0.5ng/m L、0.5ng/mL、0.3ng/mL、5ng/m L和150ng/m L;绝对回收率均高于60%,准确度均在85-115%之间,日内精密度和日间精密度均小于15%;绝对基质效应均在85-115%之间,且相对基质效应均小于15%,可认为几乎没有基质干扰。2.每种药（毒）物的不同浓度的标准溶液和血样添加样品在不同时间进样,其RT和RRT之间的相对偏差均很小,RSD均小于1%;8种药（毒）物的RT和RRT在标准品和血样添加中均比较稳定。对于保留时间的偏差而言,每个物质的出峰时间和浓度影响其偏差的大小,出峰时间越晚,偏差越大;随浓度增加保留时间的偏差稍呈减小趋势,但浓度影响较小。统计结果显示,8种药（毒）物ΔRT（绝对）和ΔRT（相对）的最大允许偏差分别为±0.05min和±1.0%;ΔRRT（相对）的最大允许偏差为±0.5%。3.8种药（毒）物的离子比率不管在标准品还是在血液添加样品中均呈现随浓度的增加趋于稳定的趋势,在较低浓度时离子比率本身的相对相差均较大;对于离子比率相对偏差的研究时,无需分区间讨论,采用一个标准即可,但其偏差与浓度高度相关,应分浓度讨论其偏差范围。当药物含量在LOQ以下低浓度时,ΔR_相对的最大允许偏差为±60%;在LOQ以上较高浓度时,ΔR_相对的最大允许偏差为±40%。4.收集的28例实际案例中定性指标的最大允许偏差100%在本实验得出的参考范围内。结论:1.本实验建立的人血液中8种药（毒）物的液液萃取和LC-MS/MS定性定量分析方法,回收率高,灵敏度高,重复性好,可用于血液中甲基苯丙胺、氯胺酮、吗啡、舒乐安定、咪达唑仑、安定、氯硝安定和苯巴比妥8种药（毒）物中毒案件的法医学鉴定。2.8种药（毒）物ΔRT（绝对）和ΔRT（相对）的最大允许偏差分别为±0.05min和±1.0%;ΔRRT（相对）的最大允许偏差为±0.5%。但此结果只针对本实验所用LC-MS/MS仪器和提取方法。3.8种药（毒）物的离子比率的偏差与浓度高度相关,当药物含量在LOQ以下低浓度时,ΔR_相对的最大允许偏差为±60%;在LOQ以上较高浓度时,ΔR_相对的最大允许偏差为±40%。但此结果只针对本实验所用LC-MS/MS仪器和提取方法。4.本实验研究的定性指标的参考范围可满足法医毒物分析工作中案件的定性,为定性分析提供了实验数据。