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目的: 探讨IMP3基因表达水平的改变对前列腺癌细胞增殖、凋亡及侵袭转移能力的影响及可能的作用机制。 方法: 采用免疫组化技术检测77例石蜡包埋的前列腺癌及癌周组织标本中 IMP3蛋白的表达水平;采用RT-PCR技术检测IMP3 mRNA在前列腺癌细胞株DU145和PC-3细胞和正常前列腺上皮细胞株 RWPE-1的表达水平;采用Western-blot验证瞬时转染技术是否成功干扰 mRNA表达含量最高的前列腺癌细胞株中IMP3基因的表达;MTT实验分析IMP3基因敲除前后细胞增殖能力的变化;流式细胞术检测IMP3基因敲除前后细胞周期比例是否发生改变;划痕实验用于评估IMP3基因表达水平的改变对细胞侵袭转移能力的影响。 结果: 1、IMP3蛋白在前列腺癌组织的表达:免疫组化显示34例前列腺癌伴远处转移组织切片中 IMP3蛋白表达的阳性率为64.7%(22/34),43例前列腺癌未转移组织切片中IMP3蛋白表达的阳性率62.8%(27/43),77例前列腺癌癌周组织切片中IMP3蛋白表达的阳性率6.5%(5/77),卡方检验显示转移组的IMP3蛋白阳性表达率明显高于未转移组和正常对照组(P<0.01),而未转移组和正常对照组之间差异无统计学意义。 2、IMP3mRNA在前列腺癌细胞的表达:RT-PCR结果显示前列腺癌细胞株DU145、PC-3、PC-3M中 IMP3mRNA表达含量分别为(6.49±0.57)、(3.61±0.72)和(7.83±0.83),正常前列腺上皮细胞RWPE-1中IMP3mRNA表达含量为(1.67±0.31),具有高转移潜能的PC-3M细胞中所含的IMP3 mRNA水平最高。 3、IMP3基因对前列腺癌细胞增殖、侵袭能力的影响:采用瞬时转染技术成功干扰PC-3M细胞中IMP3基因的表达,siRNA-IMP3(+) PC-3M细胞成功构建;MTT结果显示随着细胞培养时间的延长,从第3天开始,siRNA-IMP3(+) PC-3M细胞的增殖速度与siRNA-IMP3(-) PC-3M组相比明显减弱,并随着时间的延长,差异越显著;流式细胞仪检测结果显示,与对照组细胞相比较,siRNA-IMP3(+) PC-3M细胞G0/G1期比例显著增加(P<0.05),发生明显的G0/G1期阻滞;划痕实验显示,siRNA-IMP3(+) PC-3M细胞与对照组之间的划痕愈合程度无显著性差异(P>0.05),沉默 IMP3表达并未对 PC-3M细胞的侵袭迁移能力造成影响。 结论: 沉默IMP3基因可有效降低前列腺癌细胞的增殖能力,使细胞发生G0/G1期阻滞并促进肿瘤细胞凋亡,可能作为前列腺癌个体化治疗的一个新靶点。