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目的观察无蹼壁虎抗肿瘤活性成分对人肝癌HepG2细胞增殖、迁移和凋亡的影响，探讨无蹼壁虎抗肿瘤活性成分抗肝癌作用及相关机制，为无蹼壁虎抗肿瘤活性成分的抗肿瘤治疗及进一步的开发利用提供实验依据。材料和方法本实验中人肝癌HepG2细胞购自中科院上海细胞所。常规培养HepG2细胞（含10%胎牛血清的RPMI-1640为培养基），至细胞生长状态稳定至对数生长期后即进行试验。实验分为无蹼壁虎抗肿瘤活性成分（GekkoSwinhonis anti-neoplasm active component, GSAAC）干预组、阳性对照顺铂组（cisplatin, DDP）和正常对照组。采用MTT比色法和免疫组化法检测无蹼壁虎抗肿瘤活性成分对HepG2细胞增殖的影响，用Transwell小室观察无蹼壁虎抗肿瘤活性成分对HepG2细胞迁移、侵袭的影响，Hoechst33342荧光染色、原为末端标记（TUNEL）法和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞仪法检测不同浓度的无蹼壁虎抗肿瘤活性成分诱导HepG2细胞发生早期凋亡的作用；PI单染流式细胞术观察不同浓度的无蹼壁虎抗肿瘤活性成分对HepG2细胞周期的影响。实验结果采用SPSS13.0统计软件进行分析。结果1．无蹼壁虎抗肿瘤活性成分对HepG2细胞增殖的影响：无蹼壁虎抗肿瘤活性成分25、50、100、200、400mg·L-1剂量组对细胞增殖均有抑制作用，且100、200、400mg·L-1剂量组24h、48h、72h对HepG2细胞增殖抑制率均超过50%，呈明显的时间和剂量依赖效应关系（P＜0.05或P＜0.01）；无蹼壁虎抗肿瘤活性成分200、400mg·L-1组48h、72h细胞增殖抑制率明显高于DDP组（P＜0.05或P＜0.01）。2.无蹼壁虎抗肿瘤活性成分剂量组作用HepG2细胞48h后50、100、200、400mg·L-1剂量组细胞增殖指数（67.31±5.45%；64.36±4.56%；60.87±5.03%；53.85±3.48%；49.38±3.55%）；相比与正常对照组（72.28±6.09%），HepG2细胞PCNA的表达被抑制，细胞增殖指数降低，且呈剂量依赖性，趋势与MTT增殖抑制检测结果一致，差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。3.无蹼壁虎抗肿瘤活性成分对HepG2细胞迁移、侵袭能力的影响：无蹼壁虎抗肿瘤活性成分作用HepG2细胞24h后，各剂量组对细胞的迁移、侵袭能力均有抑制作用，其中100、200、400mg·L-1剂量组平均穿膜细胞数明显低于对照组细胞数量（P＜0.05或P＜0.01），与顺铂组比较，无蹼壁虎抗肿瘤活性成分高剂量组(200、400mg·L-1)迁移、侵袭细胞数明显减少（P＜0.01），无蹼壁虎抗肿瘤活性成分100mg·L-1组迁移、侵袭细胞数无明显减少（P＞0.05）。4.无蹼壁虎抗肿瘤活性成分对HepG2细胞凋亡的影响（1）经Hoechst33342染色后，荧光显微镜下观察：正常对照组细胞结构清晰，细胞核饱满，呈均匀蓝色；无蹼壁虎抗肿瘤活性成分各剂量组、顺铂组部分细胞出现细胞核致密浓染，固缩，细胞边缘处伴有凋亡小体产生等细胞发生凋亡特征。（2）TUNEL染色阳性反应物质位于HepG2细胞核内，经苏木素复染后细胞核呈蓝黑色，核质浓皱缩紧贴于核膜边缘处，着色呈均匀蓝色，无蹼壁虎抗肿瘤活性成分各剂量组、顺铂组作用HepG2细胞后，部分细胞形态发生凋亡，并呈簇状、放射状分布，正常对照组细胞胞核和整体非特异性着色较浅。（3）Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测结果显示，无蹼壁虎抗肿瘤活性成分25、100、400mg·L-1剂量组HepG2细胞早期凋亡率为（3.94±0.43%、6.25±1.12%、7.98±2.08%）与顺铂组HepG2细胞早期凋亡率（6.71±1.34%）明显高于正常对照组（2.36±0.23%），差异有统计学意义（P<0.01），且呈剂量依赖性关系；无蹼壁虎抗肿瘤活性成分各剂量组(除25mg·L-1)与顺铂组相比无显著差异（P＞0.05）。5.无蹼壁虎抗肿瘤活性成分对HepG2细胞周期的影响：与正常对照组HepG2细胞相比，无蹼壁虎抗肿瘤活性成分各剂量组与顺铂组均可诱导HepG2细胞S期细胞比例增高，G0/G1、G2/M期细胞比例相应降低（P<0.01）。说明无蹼壁虎抗肿瘤活性成分可有效的阻滞HepG2细胞分裂于S期（P<0.05）。结论无蹼壁虎抗肿瘤活性成分可以有效抑制HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭，其抗肿瘤机制可能是通过作用于细胞周期从而诱导细胞发生凋亡。