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第一部分重组人瘦素对慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)患者骨髓巨核细胞的影响研究背景及目的ITP(Idiopathic Thrombocytopenic Purpura)是一种慢性获得性自身免疫性疾病,其特点是患者体内产生抗血小板抗体,导致网状内皮系统破坏自身血小板。ITP的发病机制复杂,一般认为其发病机理主要为免疫因素导致血小板破坏过多,但血小板生成还与巨核细胞的正常凋亡密切相关,对于疾病过程中巨核细胞及其造血功能改变的研究尚不足。瘦素是一种对造血及免疫细胞发挥重要作用的因子,CITP患者血清瘦素水平升高,与血小板计数呈负相关,与血小板相关抗体IgG呈正相关,本研究旨在明确瘦素对CITP骨髓巨核细胞是否有影响。方法以急性巨核细胞白血病细胞株MO7e和CITP骨髓CD34~+细胞经诱导分化的巨核细胞为研究对象。运用RT-PCR检测MO7e细胞瘦素受体mRNA表达,运用Brdu-ELISA法检测瘦素对MO7e细胞的增殖作用,运用Annexin V/PI双标流式检测瘦素对MO7e细胞的凋亡作用。经TPO、SCF诱导磁珠分选后获得的CITP骨髓CD34~+细胞分化为巨核细胞,运用流式测定瘦素对其分化过程中CD41a~+、CD61~+的表达以及CD41a~+细胞的凋亡是否有影响。结果瘦素受体长型Ob-RL和短型Ob-RS在MO7e细胞均有mRNA表达。瘦素对MO7e细胞的增殖有促进作用,并呈现一定的剂量依赖性,浓度为5ng/ml即显示出促增殖效应(p=0.037),但浓度在5、10、25ng/ml之间无明显统计学差异,浓度为100ng/ml时其增殖效应最大。在时间依赖效应上,瘦素作用48h,其细胞增殖明显高于24h,而作用72h其细胞增殖介于两者之间(p=0.000)。瘦素对MO7e细胞具有抑制凋亡作用(p=0.001),而且在作用72小时后凋亡率最高。瘦素对骨髓CD34~+细胞分化为巨核细胞过程中CD41~+’、CD61~+表达的影响,与不加瘦素组相比无明显统计学差异(p＞0.05)。对CD41a~+细胞凋亡的影响与不加瘦素组相比亦无明显统计学差异(p＞0.05)。结论瘦素通过促进MO7e细胞的增殖,抑制其凋亡来参与巨核细胞白血病的发生、发展。瘦素在TPO+SCF诱导CITP骨髓巨核细胞分化中无明显协同作用,对分化产生CD41a~+巨核细胞的凋亡亦无明显作用。第二部分出血分级在特发性血小板减少性紫癜患者中的临床意义目的探讨出血分级在特发性血小板减少性紫癜(ITP)中的临床意义。方法@采用自拟ITP出血分级标准对225例ITP患者进行出血分级,采用双变量分析出血分级与PLT计数及疗效的关系。结果ITP最常见的出血部位为皮肤,致命性内出血少见。出血分级与PLT计数呈负相关,与疗效呈正相关,但相关关系不密切。结论ITP患者的出血危险与PLT计数不成绝对反比,临床出血程度较PLT计数更重要:对ITP患者进行出血分级有助于监测出血,选择治疗策略,预测疗效。