论文部分内容阅读
阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)是一种与年龄密切相关的神经退行性疾病,以由过磷酸化tau蛋白组成的神经元纤维缠结(neurofibrillarytangles,NFT)和由β-淀粉样蛋白(Aβ)组成的淀粉样斑(amyloidogenicplaques)为主要病理特征。Aβ是由β-分泌酶和γ-分泌酶对β-淀粉样前体蛋白(β-amyloid precursor protein,APP)顺序剪切后所产生,可能在AD的进行过程中发挥了重要作用。β-位点APP剪切酶1(β-site APP cleaving enzyme1,BACE1)被认为是主要的β-分泌酶,与AD密切相关。然而,关于BACE1的调节和功能目前还不十分清楚。为了进一步阐明BACE1的调控,我们先前用酵母双杂交的方法筛选与BACE1相互作用的蛋白,并得到了一种可能与BACE1相互作用的蛋白,CUTA(cutA divalent cation tolerance homolog of E.coli),并初步检测了BACE1与CUTA的外源性相互作用。CUTA是铜耐受蛋白A的同源类似物,其在细菌中与铜耐受有关。然而,关于CUTA在哺乳动物中的功能却知之甚少。在本论文中,我们采用免疫共沉淀的方法证实了CUTA能与内源性BACE1相互作用。同时,我们发现CUTA能调节BACE1的水平和APP剪切。过表达CUTA会减少Aβ和BACE1的蛋白水平,但不影响后者的mRNA水平;而下调内源性CUTA则会增加BACE1和Aβ的水平。由于铜和AD密切相关,且可能与BACE1和CUTA也有一定关系,因此我们还研究了铜、BACE1、CUTA以及APP剪切之间的关系。结果显示,铜处理HEK293-Swedish细胞,会增加其BACE1的蛋白水平,同时增强CUTA向胞外的分泌并减少细胞内的CUTA。然而,铜过载并没有增加Aβ的水平,这可能是由于APP非淀粉源剪切的增强所致,而过表达CUTA则能减弱铜过载对BACE1的影响。我们的结果提示CUTA可能在调控BACE1和APP剪切中扮演重要作用。同时,我们的结果也提示了铜、CUTA、BACE1以及APP剪切之间的可能关系。