结肠癌转移相关基因1对食管癌细胞增殖和迁移的作用及其机制研究

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[研究目的]研究结肠癌转移相关基因1 (Metastasis Associated In Colon Cancer 1, MACC1)对食管癌细胞增殖和迁移的作用及可能的机制。[研究方法]1.采用RT-PCR及Western blot检测不同食管癌细胞株EC109、 EC9706、 TE13、 EC1和正常食管上皮细胞株HEEpiC中MACC1的表达,选取低表达MACC1的细胞株TE13和高表达MACC1的细胞株EC109进行后续实验。2.构建携带MACC1的腺病毒载体Ad-MACC1和MACC1 siRNA, Ad-MACC1感染TE13细胞,增加MACC1的表达,MACC1 siRNA转染EC109食管癌细胞,降低MACC1的表达,通过Western blot检测感染或转染效果。3. Ad-MACC1和MACC1 siRNA分别处理TE13和EC109细胞后,通过MTT实验检测MACC1对人食管癌细胞增殖的影响,流式细胞术检测对MACC1细胞周期的影响。采用划痕实验及克隆形成实验观察感染或转染前后食管癌细胞侵袭及迁移变化。4.采用Western blot检测Ad-MACC1和MACC1 siRNA处理食管癌细胞TE13和EC109后的增殖细胞核抗原(PCNA)和c-MET等的表达。[研究结果]1. MACC1在食管癌细胞株EC9706和Eca109中表达较正常食管上皮细胞株HEEpiC中高,而在TE13和EC1中表达较低。2.成功构建Ad-MACC1和MACC1 siRNA, Ad-MACC1感染TE13细胞后,MACC1基因和蛋白的表达增加。而MACC1 siRNA转染EC109细胞后,MACC1基因和蛋白的表达降低。3. Ad-MACC1感染TE13细胞后,细胞的增殖和迁移明显的增加。而MACC1 siRNA转染EC109细胞后,细胞的增殖和迁移受到明显的抑制。4. Ad-MACC1感染TE13细胞后,PCNA和c-MET基因和蛋白表达明显增加,而MACC1 siRNA转染EC109细胞后,PCNA和c-MET基因和蛋白表达较阴性对照组降低。[结论]MACC1在EC9706和Eca109中表达较TE13和EC1高,其高表达可促进细胞的增殖和迁移,而表达下调后明显抑制食管癌细胞的增殖、侵袭及转移潜能,MACC1高表达促进PCNA和c-MET的表达,而低表达抑制其表达。MACC1促进食管癌细胞的增殖、侵袭及转移。其机制可能通过调节下游基因c-MET表达水平实现。
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