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背景与目的:巨噬细胞移动抑制因子(Macrophage migration Inhibitory Factor,MIF)是一种多功能的细胞因子,由垂体前叶、T淋巴细胞和单核/巨噬细胞分泌。MIF有多种生物学功能:⑴MIF的主要功能是激活T淋巴细胞,刺激B淋巴细胞产生抗体,导致炎症的发生,促进肿瘤的发生、发展;⑵MIF是炎症反应中最重要的介质。当组织损伤和感染时,LPS或α-TNF可诱导MIF的释放,参与组织损伤修复;⑶MIF具有神经内分泌功能,负反馈调节垂体激素和糖皮质激素;⑷MIF具有多种酶活性,如多巴色素异构酶、羟苯丙酮酸异构酶和蛋白质-巯基氧化还原酶等。近年来MIF在肿瘤发生、发展、侵袭及转移中的作用备受关注,其可能的作用机制是MIF上调VEGF、TNF-β、PDGF表达,促进肿瘤血管生长、侵袭和转移;MIF作用于PKC、MAPK、ERK1/2、c-jun、Jab、CSNS、P27等细胞信号转导途径,参与细胞增殖[8];MIF抑制P53依赖的细胞凋亡,致使细胞凋亡减少;MIF抑制NK细胞对肿瘤细胞的杀伤作用;MIF促进癌基因表达,如N-myc、C-fas等。RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种高效、特异的基因沉默手段,是将dsRNA导入细胞,引起特异基因mRNA降解的一种细胞反应过程。小干扰RNA(small interfering RNA , siRNA)是RNAi的效应分子,与目的基因mRNA的同源序列互补结合,导致整条mRNA失去翻译蛋白质的功能。MIFsiRNA是化学合成的靶向MIF的特异性siRNA,能够与MIFmRNA同源序列特异性的结合,导致MIFmRNA序列分解,失去翻译成MIF蛋白质的功能。本课题旨在分析瘤内注射MIFsiRNA对大肠癌生长与荷瘤小鼠生存质量的影响,并探讨其可能的作用机制,为大肠癌的治疗开辟新途径。方法:利用盲肠造疝原位接种瘤块法建立大肠癌动物模型。将成功建模后的小鼠随机分为3组,每组10只,每周2次分别注射DEPC水、MIFsiRNA(0.15nmol/g)和非特异性siRNA(0.15nmol/g)瘤内干预,每天称量各组小鼠饮水、饮食量和体重,每周测量1次肿瘤体积。干预4周后处死小鼠,称取肿瘤重量,用ELISA法检测小鼠血清中MIF和VEGF水平,用免疫组织化学法检测小鼠组织中MIF水平,分光光度法检测肿瘤组织中Caspase-3蛋白的表达,TUNEL法检测肿瘤组织中凋亡细胞数。结果:MIFsiRNA干预组小鼠血清中MIF表达比其他两组低〔(22±6)ng/ml vs(32±8)ng/ml and (33±8)ng/ml,P<0.01〕,小鼠血清中VEGF表达比其他两组低〔(1.367±0.078)ng/ml vs(1.792±0.145)ng/ml and (1.892±0.144)ng/ml,P<0.01〕,组织中MIF阳性细胞数比其他两组少〔(85±20)/500个vs(423±23)/500个and (442±31)/500个,P<0.01〕;建模后24-31d MIFsiRNA干预组小鼠肿瘤体积均明显小于其他两组(P<0.01),处死后肿瘤重量也明显轻于其他两组〔(1.93±0.21)g vs (4.40±0.30)g and (5.25±0.44)g, P<0.01〕;建模后15～31d饮水量较其他两组多(P<0.01),建模后8～31d饮食量也较其他两组大(P<0.01),三组小鼠体重变化无统计学意义(P>0.05);MIFsiRNA干预组小鼠肿瘤组织中Caspase-3蛋白表达比其他两组高〔(0.74±0.06)μg vs (0.57±0.08)μg and (0.56±0.02)μg,P<0.01〕,凋亡细胞数较其他两组多〔(12±2)?100个vs 0 and 0,P<0.01〕。结论:敲低MIF基因表达可以抑制大肠癌的生长,提高荷瘤小鼠的生存质量,其可能的作用机制是激活Caspase-3促进细胞凋亡;通过下调VEGF表达抑制肿瘤血管生成。